肝细胞生长因子对重症急性胰腺炎小鼠肠黏膜屏障保护作用分析-外科学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 1 肝细胞生长因子对重症急性胰腺炎小鼠 肠黏膜屏障保护作用研究 中文摘要 目 的：建立重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）小鼠模型；探讨肝细 胞生长因子(HGF)对 SAP 小鼠肠黏膜屏障功能障碍修复作用及机理；进一步了解 肠道干细胞在黏膜损修复中的作用。 方 法：健康雄性昆明小鼠 60 只，随机分成 3 组：正常对照（NC）组,重症急性胰 腺炎（SAP）组，重组人肝细胞生长因子(rHGF)治疗(SAP+rHGF)组。采用腹腔分 次注射大剂量 L－精氨酸（2×2mg/g），两次间隔 1h 的方法制备 SAP 模型。 SAP+rHGF 组制模后即腹腔注射 rHGF (150ug/Kg.d 的剂量分两次给药)，连续应用 4 次。NC 组为腹腔注射等量无菌生理盐水。自动生化分析仪测定小鼠血清淀粉酶， 酶耦联紫外分光光度法检测血浆 D-乳酸水平，流式细胞仪检测肠上皮细胞增殖指 数，免疫组化染色法检测小肠隐窝干细胞变化，肠系膜淋巴结、胰腺、肝脏及肺 活体组织细菌培养，以及观察胰腺和肠黏膜屏障病理改变。 结 果：1、SAP 组与 NC 组比较，血清淀粉酶值显著升高，(828.50±67.35)U/dl vs (345.34±48.40)U/dl，P0.001；SAP+rHGF 组与 SAP 组比较，血清淀粉酶显著下降， (476.46±52.50)U/dl vs (828.50±67.35)U/dl，P0.001，与 NC 组比较，显著升高， (476.46±52.50)U/dl vs (345.34±48.40)U/dl，P0.001。 2、胰腺病理结果：NC 组未见明显异常；SAP 组胰腺组织充血、水肿，间质 及腺泡小叶大量炎细胞浸润；SAP+rHGF 组较 SAP 组胰腺组织充血、水肿明显减 轻，炎细胞浸润减少。 3、小肠病理检查结果：NC 组未见明显异常；SAP 组小肠绒毛坏死、脱落， 排列紊乱，黏膜变薄，肠壁水肿、充血，黏膜下大量炎细胞浸润。SAP+rHGF 组 肠绒毛形态基本完整，部分坏死，排列尚整齐，肠壁充血、水肿，炎细胞浸润情 况叫 SAP 组明显减轻。 4、血清 D-乳酸水平：SAP 组与 NC 组比较血清 D-乳酸明显升高，(11.17±1.90) ug/ml vs (4.87±0.73)ug/ml，P0.001；SAP+rHGF 组与 SAP 组比较明显下降，(7.30±0.88) ug/ml vs (11.17±1.90)ug/ml，P0.001。 5、器官细菌移位率：胰腺、肠系膜淋巴结、肝脏、脾脏、肺脏细菌培养器 官移位率(培养阳性脏器数/ 培养脏器总数)，SAP 组与 NC 组比较明显升高，50% vs 14%，P0.001；SAP+rHGF 组与 SAP 组比较器官细菌移位率下降，29% vs 50%， P0.001。 6、肠黏膜上皮细胞增殖指数（proliferation index,PI）：SAP 组较 NC 组 PI 明 显下降， (2.84±1.68) vs (4.95±2.24)，P0.05；SAP+rHGF 组较 SAP 组 PI 明显升高， (8.82±2.03) vs (2.84±1.68)，P0.001；SAP+rHGF 组与 NC 组比较 PI 明显升高， (8.82±2.03) vs (4.95±2.24)，P0.001。 7、小肠隐窝干细胞数变化：SAP 组与 NC 组比较小肠隐窝干细胞数明显下降， (1.26±0.87) vs (2.16±0.90)，P0.05； SAP+rHGF 组与 SAP 组比较明显升高， (2.50±0.96) vs (1.26±0.87)，P0.001；SAP+rHGF 组与 NC 组比较无明显变化， (2.50±0.96) vs (2.16±0.90)，P=0.344。 结 论：应用肠黏膜保护剂rHGF后SAP小鼠肠道通透性及细菌移位率明显下降， 提示rHGF对降低SAP细菌感染发生率，减少并发症有一定作用；rHGF通过促进短 暂增殖细胞分化成终末分化细胞以取代坏死脱落的肠黏膜上皮细胞；rHGF可促进 小肠干细胞增殖再生隐窝重建严重受损的肠黏膜。 关键词：急性胰腺炎，肠屏障，肝细胞生长因子，干细胞 The Protective Effect of Hepatocyte Growth Factor on Intestinal mucosal barrier following Severe Acute Pancreatitis in mouse Abstract Objective:To set up the mouse model severe acute p