肥大细胞在前列腺增生和前列腺腺癌组织中的分布及生物学意义-临床检验诊断学专业论文.docxVIP

研究生学位论文 研究生学位论文 研究生学位论文 研究生学位论文 胆大细胞兔疲组织化学 染色系统和抗原修复方法的研究 研究生 邓文斌 导师 李萍教授 摘要 目的探讨肥大细胞免疫组织化学染色系统和抗原修复方法。方法 以 肥大细胞特异的类膜蛋白酶作为标记蛋白，用碱性磷酸酶标记链亲合素. 生物素 CAP-LsAB )系统和辣根过氧化物酶标记链亲合素 生物素 CHRP-LsAB) 系统分别染色石蜡包埋肺组织中肥大细胞，比较其染色效 果:并用高压、膜蛋白酶和微波三种方法进行类膜蛋白酶抗原修复，比 较修复效果。结果 AP-LsAB 系统染色比 H盯-LsAB 系统背景清晰、颜 色对比鲜明:高压修复效果优于膜蛋白酶和微波修复。结论染色肥大 细胞推荐使用 AP-LsAB 系统和高压修复抗原的方法。 关键词肥大细胞类膜蛋白酶免疫组织化学 PAGE PAGE 4 PAGE PAGE 3 Comparing two kinds of Labeled Streptavidin Biotin (LsAB) Method and Selecting the best Antigen Retrieval Method Postgraduate Wenbin Deng Supervisor Ping Li Abstract Objectives To provide the optimal method of two kinds of labeled streptavidin biotin me也od (LsAB) and antigen retrieval. Me曲。ds Adopting alkaline phosphatase (AP) LsAB and horseradish peroxidase 但RP) LsAB method to stain tryptase in p缸affin imbedding pulmon缸y tissue and compare staining effect; antigens were repaired by high press町e cooking， 的rptin digestion and microwave ，whose effect was ∞mpared. Results The backgrounds of stained sections were more distinct and the color distinction of nucleus and positive signal were brighter by AP-LsAB than HRP-LsAB; the repairing effect of high press田e cooking were better than tryptin digestion and microwave. Conclusions AP-LsAB and high pressure cookirtg retrieval were recommended to adopt in immunohistochemical staining of pulmonary tissue. Key words mast cells ，tryptase，immunohistochemistry 前言 肥大细胞是系统发生学的一种成熟细胞。在哺乳动物，肥大细胞分 布于除骨、软骨和眼球角膜的结缔组织，并以相当 致方式围绕血管、 淋巴管、和神经末梢分布 [1J 。它是一种成活时间长的多功能分泌细胞， 胞浆内有大量由蛋白多糖基质、肝素组成的高电子密度颗粒。颗粒中的 蛋白酶有类膜蛋白酶、类廉蛋白酶和竣肤酶 A ，并且全都与肝素结合在 颗粒中，类膜蛋白酶一旦与肝素分离便丧失其活性。依据肥大细胞内中 性蛋白酶的含量，将肥大细胞分为两种亚型:含有类膜蛋白酶 (tryptase) 和类庚蛋白酶 (chymase) 的肥大细胞 MCTC 和含有类膜蛋白酶 Ctryptase) 而不含有类朦蛋白酶 (chymase) 的肥大细胞 MCT 。类膜蛋白酶是肥大细胞 的特异性中性蛋白酶，同时又是肥大细胞活化的 种标志物，测定体液 中类膜蛋白酶活性可直接反映疾病发生过程中肥大细胞的生化作用 [2. 3 4J 。以肥大细胞特异类膜蛋白酶作为标记蛋白，使用免疫组织化学染色肥 大细胞，比传统的甲苯胶蓝法更特异、更敏感地反映病变组织的肥大细 胞数量变化[匀。优选免疫组织化学染色系统和抗原修复的方法，为研究 肥大细胞与疾病的关系提供方法学基础。 标记链亲合素-生物素 (LsAB) 是一种敏感性、特异性高以及染色 背景清晰的免疫组