肝硬化肠道细菌移位与多器官功能损伤、肠黏膜免疫异常的初步探讨-内科学(消化系病)专业论文.docxVIP

贵阳医学院 贵阳医学院 2012 届硕士研究生论文 PAGE PAGE 10 肝硬化肠道细菌移位与多器官功能损伤、肠黏膜免疫异常的初步探讨 消化内科 研究生：胡艳艳 导师：周力 刘苓 摘要 目的：探讨肝硬化（Liver Cirrhosis，LC）肠道细菌移位（Bacterial Translocation， BT）与多器官组织病理和功能变化的相关性及肝硬化 BT 与回肠黏膜 CD3、CD4、 白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）的关系。 方法：40 只雄性 SD 大鼠，鼠龄（3 月左右)，体质量（250 ± 20）g。随机分为 正常对照组（（Normal Control，NC）组，10 只），肝硬化模型组（LC 组，30 只）。肝硬化模型组采用改造的复合病因诱导大鼠肝硬化模型，将肠系膜淋巴结 匀浆进行细菌培养，以细菌培养结果分为 BT 阳性组和 BT 阴性组；留取股动脉 血检测肝肾功能及血氨；行肝、肾、脑及回肠组织病理学检测（苏木精-伊红染色）。 采用免疫组化（Immunohistochemical，IHC）方法检测回肠黏膜组织 CD3、CD4 及 IL-1β的表达。 结果：成功复制了肝硬化大鼠模型。NC 组大鼠未发生细菌移位；LC 组大鼠细菌 移位率为 69.23 %，其中大部分为大肠埃希氏细菌（88.9 %）。BT 阳性组血清白 蛋白显著低于 BT 阴性组（P 0.05）。BT 阳性组血氨水平显著高于 BT 阴性组（P 0.05）。与 BT 阴性组比较，BT 阳性组有更为显著的肝、脑及回肠组织病理改 变。BT 阳性组回肠黏膜组织中 CD3、CD4 表达高于正常对照组，有统计学差异 （P 0.05）；BT 阴性组回肠黏膜组织中 CD3、CD4 表达与正常对照组及 BT 阳 性组相比，均无统计学差异。BT 阳性组回肠黏膜组织中 IL-1β表达高于 BT 阴性 组，有统计学差异（P 0.05）。 结论：BT 是肝硬化常见的病理生理变化，其发生与肠道屏障功能减弱、明显的 肝功能减弱、潜在增加的发生肝性脑病的可能性相关。细菌移位诱导肝硬化大鼠 局部肠黏膜免疫屏障的显著活化状态，进而可能参与加重肝脏损伤和并发症发生 的全身性炎症反应。 关键词：肝硬化；细菌移位；肝性脑病；肠黏膜免疫；CD3；CD4；白细胞介素 -1β 前言 肝硬化是慢性肝病的终末阶段，以肝组织弥漫性纤维化、假小叶和再生结节 形成为病理特征。患者常死于内毒素血症、消化道大出血等并发症，因此预防和 控制肝硬化并发症是治疗肝硬化的一个十分重要的目标。 近来的研究表明，细菌移位是全身并发症的根源[1]，肠道菌群和 BT 在肝硬 化并发症发生、发展的机制中起着重要的作用[2]。事实上，许多肝硬化严重的并 发症，由 BT 引发或加剧，包括肝性脑病，肝肾综合征，肝肺综合征以及肝功能 衰竭[3]。BT 是指肠道内细菌或细菌产物如内毒素转移至非正常的部位如肠系膜淋 巴结（Mesenteric Lymphonode，MLN）或门静脉系统，进一步转移至远离肠腔的 其他组织器官，表示正常的宿主和菌群之间的平衡被破坏。 当前国内外研究人员对肠道细菌与宿主相互作用进行了一系列研究，肠道菌 群在肠道黏膜和全身免疫系统的发展中发挥重要作用[1]。正常情况，细菌移位至 MLNs 是一种生理性的重要免疫功能，可对机体经常保持免疫刺激，对免疫系统 非常有利，侵入的微生物可以被机体的免疫系统所清除[4]。“病理性”BT 与细菌 播散或局部/全身炎症反应有关，决定 BT 正常与否的一个重要因素是肠黏膜免疫 [5]。肠黏膜免疫屏障主要由肠黏膜相关淋巴组织（gut associated lymphoid tissue， GALT）构成。GALT 由上皮内淋巴细胞、固有层淋巴细胞，皮氏小结(Peyer’s Patches，PP)和肠系膜淋巴结组成[6]，它们在防止细菌粘附及移位方面起重要作用。 肝硬化发生 BT 患者或动物模型，肝、肾、脑等多脏器损伤与 BT 的相关性 如何，这种组织和功能损伤在肝硬化的病理机制中有着怎样的地位及肠黏膜免疫 屏障在 BT 的发生中有着怎样的作用，目前仍不清楚，目前国内外对细菌移位与 多器官组织病理功能变化及肠黏膜免疫系统的关系研究尚不多。我们采用复和因 素法建立大鼠肝硬化模型，并通过对大鼠的肠系膜淋巴结进行细菌培养确定有无 BT，分析 BT 与肝脏和其他重要器官组织及功能损伤的关系。并应用免疫组化方 法，分析模型大鼠末端回肠黏膜 T 淋巴细胞 CD3+、CD4+细胞的数量改变，同时 检测模型大鼠回肠末端黏膜组织中细胞因子 IL-1β 表达的变化，以期深入了解肝 硬化 BT 发生时肠黏膜免疫屏障的变化，以帮助临床进一步认识肝硬化肠黏膜细 胞免疫功能的变化与