葛根素对体外高糖培养人脐静脉内皮细胞影响的试验研究-中西医结合临床肾病专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 2 摘 要 目的：（1）观察高糖对培养人脐静脉内皮细胞的影响；（2）观察葛根素对高糖 造成人脐静脉内皮细胞损害的拮抗作用。 方法：（1）按人脐静脉内皮细胞（HUVEC）体外常规培养模式，建立并确认培 养 HUVEC[1]。（2）将常规培养的 HUVEC 分组换液为含不同葡萄糖浓度（5.5mmol/L、 11 mmol/L、22 mmol/L、33 mmol/L、44 mmol/L、55 mmol/L）的 DMEM 培养液， 分别培养 1d、2d、3d、4d，通过形态学观察、MTT 法，研究高糖对 HUVEC 的影响。 （3）高糖（33 mmol/L）培养组分为葛根素 0 组，0.5mg/L 组、1.0 mg/L 组、2.0 mg/L 组、5.0 mg/L 组、10.0 mg/L 组，正常（5.5 mmol/L）组同样分组。每组 再分为两部分，分别培养 24h 和 48h 后 ，MTT 法测定每组光密度值，计算抑制 率。（4）各组细胞培养 24h 及 48h 后收集细胞上清液，检测上清液中 TM、vWF、 t-PA、PAI-1 含量及 SOD 活力。 结果：（1）糖浓度 22mmol/L、33mmol/L、44mmol/L、55mmol/L 培养 1d；11 mmol/L、 22mmol/L、33mmol/L、44mmol/L、55mmol/L 培养 2d、3d、4d，HUVEC 增殖均受 到抑制（以 55 mmol/L 培养 4d 最显著），并与葡萄糖浓度、作用时间延长成正相 关。（2）高糖环境下培养细胞上清液中 TM、vWF、PAI-1 含量显著增加、t-PA 含 量和细胞 SOD 活性显著降低均有统计学意义。葛根素组细胞增殖抑制率降低与模 型组相比较也具有统计学意义。（3）葛根素组 TM、vWF、PAI-1 含量明显低于模 型组（P0.01），葛根素组 t-PA 含量明显高于模型组（P0.01），SOD 活力高于 模型组（P0.01）。 结论：（1）高糖对 HUVEC 增殖具有明显抑制作用，并与葡萄糖浓度或作用时间 成正相关。（2）葛根素可一定程度拮抗高糖环境对培养 HUVEC 的 TM、vWF、PAI-1 、 t-PA 含量和 SOD 活性的异常改变，对其具有保护作用。 关键词：高糖，人脐静脉内皮细胞，葛根素 Abstract Purpose: (a)observing the effect of highly concentrated dextrose to the culture of HUVEC; (b)observing the restraining effect of kud zu root medicine to the harm of dextrose on HUVEC. Methods: (a)Establish and make sure of cultivating HUVEC accor ding to the normal exterior cultivating model of HUVEC; (2) divide the normally cultivated HUVEC into different groups of DMEM cultur e fluid with dextrose densities (5.5mmol/L, 11 mmol/L, 22 mmol/L, 3 3 mmol/L, 44 mmol/L, 55 mmol/L), study the effect of highly conce ntrated dextrose to HUVEC by cultivating respectively 1d, 2d, 3d, 4 d and through morphology observation and MTT method; (c) divid e the highly concentrated dextrose (33 mmol/L)cultivating groups i nto kudzu root medicine 0group, 0.5mg/Lgroup, 1.0 mg/L group, 2. 0 mg/Lgroup, 5.0 mg/Lgroup, 10.0 mg/Lgroup. The norma（l 5.5 mmo l/L）group is divided in the same way. Each group is subdivided int o two groups to cultivate for 24hours and