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课件:染色体与DNA1.ppt
三、 DNA的高级结构 DNA的高级结构指DNA双螺旋进一步扭曲盘旋所形成的特定空间结构。 超螺旋结构是DNA高级结构的主要形式,可分为正超螺旋和负超螺旋两类,它们在不同类型的拓扑异构酶作用下或特殊情况下可相互转变,如: 拓扑异构酶 溴乙啶 拓扑异构酶 溴乙啶 负超螺旋 正超螺旋 松弛DNA DNA扭曲与双螺旋方向相反(松开) DNA扭曲与双螺旋方向相同(拧紧) * 正超螺旋:如过度盘绕(多转),那么会向相反方向扭曲。 负超螺旋:如盘绕不足(少转)。 松弛DNA 正超螺旋 负超螺旋 * 线状DNA形成的超螺旋 * 环状DNA形成的超螺旋 * 使DNA形成高度致密状态从而得以装入核中; 推动DNA结构的转化以满足功能上的需要。如负超螺旋分子所受张力会引起互补链分开导致局部变性,利于复制和转录。 DNA的超螺旋结构形成的意义 * * 染色体在遗传上起着主要作用。 * DNA作为遗传物质所具备的特点: 1)具有相对的稳定性; 2)能够精确的自我复制,使亲代与子代间保持遗传的连续性; 3)能够指导蛋白质合成,控制新陈代谢过程和性状发育; 4)在特定条件下产生可遗传的变异。 * * 原核生物由一个环状DNA分子构成的单个染色体 ;真核生物2条染色体, 为双倍体,基因组数量为其中一条染色体。基因组从生物信息含量;C值指的是化学含量,不强调遗传信息的量 * ??推测DNA和蛋白结合使DNA缠绕成周期性的重复结构 ??暗示染色体中存在某些亚单位 * ??表明组蛋白有规律地结合在DNA上?? 暗示染色质可能以200 bp为一个单位 * DNA结构的不同造成生物的多样性 * * 核苷酸是核酸的基本结构单位。其中戊糖和碱基构成核苷;核苷与磷酸以一定的连接方式连接,构成核苷酸。核苷酸中戊糖、磷酸的组成相对固定,碱基可变,造成核苷酸的多样性。 * DNA是核酸的一种组成形式,主要存在于细胞核中,少量存在于线粒体和叶绿体中;RNA主要在细胞质中 * 美国冷泉港实验室 贝克等(Bak, A. L., 1977):染色体四级结构模型理论能够在一定程度上解释染色质状态转化的过程 一级结构:核小体 二级结构:螺线管 三级结构:超螺线体 四级结构:染色单体 4、染色质 P27 * * 1956年,Wilkins和Vittorio Luzzati对染色质进行了X衍射研究,发现染色质具有间隔为100埃的重复性结构。(这意味着什么?) 1971年,Clark和Felsenfeld用葡萄球菌核酸酶作用染色质,发现有些区域对核酸酶不敏感,且不敏感的区域比较均一。 (这暗示着什么?) 核小体 * 1973年,Hewish和Burgoyun用内源核酸酶消化细胞核,再从核中分离出DNA,结果发现一系列DNA片段,它们相当于长约200bp的一种基本单位的多聚体。 (意味着什么?) 核小体 1974年,M.Noll用外源核酸酶处理染色质,然后进行电泳,测得前三个片段的长度分别为205bp、405bp、605bp (表明什么?) * Olins夫妇(1974)和Pierre Chambon等(1975)在电镜下观察到染色质的“绳珠”状结构,小球的直径为100埃。“ν小体”“钮体” X衍射图表明组蛋白的多聚体是紧密相连,并无可容纳象DNA分子那样大小的空洞。表明什么? * 1974年,Kornberg和Thomas用微球菌核酸酶部分消化染色质,切断一部分200bp单位之间的DNA,使其中含有单体、二聚体、三聚体和四聚体等。然后经梯度离心将它们分开。每一组再通过凝胶电泳证明其分子大小及纯度。然后分别用电镜来观察各组的材料,结果单体均为一个100埃的小体,二聚体则是两个相联的小体,同样三聚体和四聚体分别由三个小体和四个小体组成。表明什么? 1984年,Klug和Butler修正核小体模型。?? * * * 核小体的梯度离心和电泳 * 核小体构成 * 146bp DNA + Histone octamer (组蛋白八聚体) →Nucleosome core (核小体核心) + H1→Chromatosome (染色小体 166bp) + linker DNA → Nucleosome(核小体) (~200 bp of DNA) * 解释核小体结构的对称模式认为,H32-H42 四聚体处于对称结构的中心,上下各有一个H2A-HAB 二聚体。 在体外,DNA 能直接缠绕到完整的(交联)八聚体上,也可用DNA先和2H3-2H4 四聚体反应,再添加两个H2A-H2B 二聚体,最后完成组装 * 染色质高级结构 30nm * * 从核小体到染色体视频 * * 三、原核生物和真核生物基因组结构特点比较 1、原核生物基因组结构特点
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