高分辨率熔解曲线分析检测常见β-地中海贫血突变的方法学建立及其在产前诊断中的应用妇产科学专业论文.docxVIP

英汉简略词索引  PAGE 9 英汉简略词索引 英文中文英文缩写 β-thalassemia P o l y me r a s e Ch ai n R ea ct i o n Single Nucleotide Polymorphism Mean Corpuscular Volumeβ-地中海贫血 聚合 酶 链反 应 单核苷酸多态性 平均红细胞体积 β-thal PCR SNP MCV Mean Corpuscular Hemoglobin Haemoglobin A2红细胞血红蛋白平均浓度 血红蛋白 A2MCH HbA2 Reverse Dot-Blot反向斑点杂交方法 RDB High Resolution Melting高分辨率熔解曲线 HRM revolutions per minute转速每分钟 rpm base pair碱基对 bp double distilled water denaturation temperature双蒸水 解链温度 ddH2O TM Graft-versus-host disease移植物抗宿主病 GVHD Preimplantation genetic diagnosis胚胎植入前遗传学诊断 PGD广州医科大学硕士学位论文 高分辨率熔解曲线分析检测常见β-地中海贫血突变 的方法学建立及其在产前诊断中的应用 中文摘要 目的 β-地中海贫血是最常见的单基因遗传病之一，重型 β-地中海贫血死亡率极 高，预防该病主要依赖于基因诊断，但常用的反向斑点杂交法耗时长、结果不稳 定，有时出现假阳性与假阴性，而高分辨率熔解曲线分析(HRM)具有快速、灵敏 度高、价格低廉等优点。本研究旨在建立检测常见 β-地中海贫血突变的 HRM 方 法，并进一步探讨该方法在产前诊断应用的可行性，以期建立 β-地中海贫血产前 基因诊断的第二技术验证平台。 方法 1. 选取 1 例经测序证实的无 β-珠蛋白基因突变的健康对照者、21 例经测序 证实基因型为-28、CD17、CDs41-42、CDs71-72、IVS-Ⅱ-654、CDs41-42/71-72， -28/CDs41-42，-28/CD17、-28/IVS-Ⅱ-654、-28/CDs71-72 的基因组 DNA，建立 应用 HRM 检测常见 β-地中海贫血基因突变的方法。 2. 应用建立的 HRM 方法随机检测 78 例父母双方均为 β-地中海贫血突变携 带者的产前诊断标本（羊水、脐血、绒毛），同时行反向斑点杂交法（RDB）及 DNA 测序对比实验。 结果 1. 所建立的 HRM 法能准确检测出 21 例 β-地中海贫血突变，包括-28、CD1 7、CDs41-42、CDs71-72、IVS-Ⅱ-654、CDs41-42/71-72，-28/CDs41-42 等 2. HRM 法对 78 例父母双方均为 β-地中海贫血基因携带者的产前诊断标本 进行检测，结果显示：与 RDB 法及 DNA 测序结果一致，且通过测序发现了一 个 SNP 位点：c.316_185CT。 中文摘要 结论 所建立的 HRM 方法具有简便、准确、灵敏度高等优点，有望在产前诊断领 域检测 β-地中海贫血基因突变方面有很好的应用前景。 关键词 高分辨率熔解曲线；HRM; 地中海贫血；β-地中海贫血;基因突变 广州医科大学硕士学位论文 Development and Application of High-resolution melting analysis for the detection of common bet a-thalassemia mutations in prenatal diagnosis Abstract Objective Beta-thalassemia is one of the most common monogenic inherited diseases. The mortality of beta-thalassemia major is extremely high and the prevention of this disease mainly relies on genetic diagnosis, but common methods like R everse Dot-Blot are time-consuming，complicated operation and the results are not completely rel