miRNA221和miRNA222与胶质瘤理分级及预后的关系研究.docxVIP

天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤，约占颅内肿瘤的46％。按照 世界卫生组织脑瘤病理分类共分四级，其中III级间变性胶质瘤与Ⅳ级胶质母细 胞瘤均为恶性胶质瘤，预后很差，死亡率高。胶质瘤呈浸润性生长，手术很难 完全切除；化疗和放疗不能高度特异性的杀伤胶质瘤细胞，治疗效果差，还可 能产生中枢神经系统的毒、副作用。所以即使采用综合治疗后，其预后仍很差。 III级间变性胶质瘤的中位生存期为1．5年，而Ⅳ级胶质母细胞瘤的中位生存期仅 为9-12个月。胶质瘤是一种多基因异常疾病，胶质瘤发生发展主要是原癌基因 的激活与抑癌基因的失活并由此产生一系列基因异常和动态演进的结果。 MiRNA是一类长约19．25nt的非编码RNA，能够与靶基因的3’端非转录区 域(3’untranslated region，3UTR)特异性结合而导致靶mRNA降解或抑制其翻译， 从而对基因进???转录后调控。在人类细胞中约30％的蛋白编码基因受miRNA的 调控，具有高度的保守性、时空和组织特异性。同一miRNA可以调控多个mRNA 基因，不同miRNA分子也可以协同调控同一mRNA基因。因此，miRNA与其 靶标基因之间组成了一个复杂的调控网络，控制着细胞及个体的重要生命活动。 目前研究发现miRNA表达与多种癌症相关，其在肿瘤发生发展过程中起着 至关重要的作用，肿瘤中表达水平异常的miRNA可能发挥类似癌基因或抑癌基 因的作用。虽然miR-221和miR．222在胶质瘤中的研究仍处于起步阶段，但大 量文献报道其在恶性胶质瘤中呈高表达状态并发挥着类似癌基因的作用，它参 与多种信号通路的活化与抑制，并影响肿瘤包括增殖、凋亡和转移在内的各种 生物学行为。除此之外miR-221和miR．222还在肺癌、结肠癌、胃癌、前列腺 癌等多种肿瘤中的表达也异常增高。这些研究都表明miR．221和miR．222可能 以一种原癌基因的身份影响着各种肿瘤的表型及预后。 MiR．221和miR-222的基因座位于染色体XpU．3区带，成簇分布，种子序列完 全同源，具有许多相同的特异性作用靶点。这两个miRNA在原发GBM及GBM细 胞株中表达上调。miR．221和mig．222过表达还出现在WHO I～IV级星形细胞瘤。 miRNA在生物体中的作用取决于其调控的靶基因所起的作用。通过查询3个 miRNA靶预测数据库，预测出miR．221和miR．222可能调控的靶基因约300余个。 有研究表明，miR．221和miR．222被敲低后，多个基因的表达发生变化，抑癌基因(如 PTEN、p27、C。43)上调，促凋亡基因(P[IPUMA、Bax、caspase．3)Az调，抗凋亡基因  天津医科大学硕士学位论文 (bel．2)下调，抗侵袭基因(TIMP3)上调。通过敲低miR．221和miR．222的表达，影响 到多个基因的表达水平，从而在多个方面影响了胶质瘤细胞的生物学性状，如增 殖、侵袭和凋亡等，以达到抑制胶质瘤生长的作用。多项研究表明在甲状腺乳头 状癌、胰腺癌以及胶质母细胞瘤中miR-22 1和miR．222表达上调病例的预后往往 不佳。本课题重点研究了miR．221和miR-222与胶质瘤病理分级及预后的关系， 以期为胶质瘤诊断和治疗提供新的靶标。 本课题实验分为以下二部分： 第一部分：应用Real Time实时荧光定量PCR和荧光原位杂交检测(FIsH) 的方法对120例胶质瘤各级别的手术标本进行miR-221和miR．222的定量检测， 结果发现miR-221和miR-222在脑胶质瘤中异常高表达，并与脑胶质瘤分级呈 明显正相关。 第二部分：对120例胶质瘤患者进行随访，应用Kaplan．Meier法以及单因 素和多因素分析，结果发现miR一221和miR-222的表达与胶质瘤预后关系密切。 本研究可以得出如下结论： 1．miR．221和miR-222的表达与脑胶质瘤WHO分级呈明显正相关。 2．miR-221和miR．222的表达与脑胶质瘤预后呈负相关，即miR-221和 miR0222高表达，则胶质瘤患者预后差；miR．221和miR-222低表达，则胶质 瘤患者预后好；miR-221和miR-222可独立作为胶质瘤患者的预后因素。 关键词：胶质瘤病理分级预后miR一221 miR-222  天津医科大学硕士学位论文 Abstract Glioma is the most common primary central nervous system tumors，accounting for about 46％of intracranial tumors．According to the WHO classification of