番茄红素对脑缺血再灌注大鼠氧化应激及缺氧损伤的影响营养与食品卫生学专业论文.docxVIP

复【1．人学fi养：j专品I!生学硕Ij学位论文 复【1．人学fi养：j专品I!生学硕Ij学位论文 中义摘竣 摘 要 目的：脑卒中是人类致残和死亡的重要原因之一，大量研究表明，氧化应激在脑 缺血后神经元的继发损伤中起到了关键作用。番茄红素(1ycopene，LP)是膳食中的 一种抗氧化成分。近年来，LP对心脑血管的保护作用越来越受到关注。本研究 旨在从氧化应激和缺氧损伤两个方面观察番茄红素对脑缺血再灌注大鼠脑组织 的保护作用并探讨其可能机理。 方法： 1．大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型的建立 260-2809雄性健康SD大鼠20只，按体重随机分成4组，每组5只。制作模型 时A、B、C、D组插入的栓线直径分别为0．22ram、0．24mm、0．26mm、O．28 mm。 MCAO模型手术操作参照改良Zea Longa法。根据各组大鼠MCAO模型成功率探 索最适合模型栓塞效果的栓线直径。 2．番茄红素对脑缺血再灌注大鼠氧化应激及缺氧损伤的缓解作用 130-140 g SPF级雄性健康SD大鼠64只，按体重随机分为番茄红素高剂量 组(LPH)、番茄红素低剂量组(LPL)、模型对照组(Model)各16只，假手术组(SH AM)10只和正常对照组(Nor)6只。LPH、LPL组大鼠每日分别以20、5 mg／l(g．bw 番茄红素灌胃，Model组、SHAM组大鼠给予等量色拉油。灌胃15d后，Model 组、LPL组和LPH组实施MCAO手术造模，缺血2h后进行再灌注；StlAM组 施予假手术。术后禁食24h。分别于再灌注3h、24h后对各组大鼠进行神经功能 行为评分；再灌注24h后计算脑梗死体积，测定脑皮质组织超氧化物歧化酶 (Superoxide Dismutase，SOD)、过氧化氢酶(Catalase，CAT)、丙二醛 (Malondialdehyde，MDA)、活性氧(Reactive Oxygen Species，ROS)、一氧化氮 (Nitricoxide，NO)、一氧化氮合成酶(Nitricoxide Synthase．NOS)、诱导型一氧化氮 合成酶(InducibleNOS，iNOS)、乳酸(Lactic Acid，LD)及乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase，LDH)的含量或活性，以及血清尿酸(Uric Acid，UA)水平；并采用 RT-PCR法检测脑皮质及海马组织中缺氧诱导因子．1ct(Hypoxia-Inducible Factor-10t，HIF．1 c【)mRNA、B细胞淋巴瘤／白血病．2(B cell lymphomaJleukemia．2， 复口．人学营养1j食-W≯生学硕l：学位论文 复口．人学营养1j食-W≯生学硕l：学位论文 中义摘要 Bcl．2)mRNA的表达水平。 结果： 1．MCAO模型成功大鼠出现明显的Homer体征，其中B组(直径0．24 mm)大鼠 模型成功率最高；D组(直径O．28 mm)大鼠死亡率最高；A组(直径O．22 ram)、及 C组(直径0-．26 ram)大鼠因栓塞不完全和脑出血率较高，模型成功率均较低。 2．(1)LP对大鼠神经功能评分、脑梗死体积及脑指数的影响：LPH组、LPL组 再灌注3h、24h神经评分及脑梗死体积均低于Model组(尸O．05)，且LPH组脑 梗死体积低于LPL组(尸O．05)；LPH、LPL及Model组脑指数均高于SHAM组 及Nor组，LPH组脑指数较Model组降低，差异均有显著性意义俨0．05)。 (2)LP对脑缺血再灌注24h后氧化应激的影响：LPH、LPL组大鼠缺血侧脑皮 质MDA、ROS及血清UA水平分别为(1．01i0．08 nmol／mgprot，1 14．23+18．91 Fluo unit／gprot，154．56士15．39 umo!／L)，(1．09+0．05 nmol／mgprot，135．89114．17 Fluo unit／ gprot，164．42+14．76 umol／L)，与Model组相比均下降(PO．05)；LPH、LPL组大 鼠缺血侧脑皮质CAT活性分别为(1．20-士0．1 l U／mgprot)，(1．08土0．15 U／mgprot)， LPH组SOD活性为(13．88+0．91 U／mgprot)，均高于Model组(P0．05)。(3)LP对 脑缺血再灌注24h后继发炎症反应及缺氧损伤的影响：LPH、LPL组、Model组 大鼠缺血侧脑皮质NO含量和NOS、iNOS活性分别为(6．60+0．771amol／gprot， O．817+0．016 U／mg prot，0．502士0．022