药物分析--药物定量分析与分析方法验证.ppt

外标法： AX：供试品的峰面积；AR：外标物质的峰面积 CX：供试品的浓度；CR：外标物质的浓度 由于微量进样器不易精确控制进样，当采用外标法定量时，宜用自动进样器进样。 气相色谱法 对仪器的一般要求 色谱柱：填充柱（材质：不锈钢或玻璃，载体：硅藻土或高分子多孔小球）或毛细管组柱（材质：玻璃或石英，固定液：甲基聚硅氧烷等）. 检测器：氢火焰离子化检测器 进样量：数微升 检测温度：250～350?C（以免水汽凝结） 《中国药典》中规定的条件除检测器种类、固定液品种、及特殊指定的色谱柱材料不得任意改变，其他如色谱柱内径、长度、固体液涂布浓度、进样量等可适当改变，以适应具体体系。一般色谱图约于30min内记录完毕。 气相色谱系统适应性实验同高效液相色谱。 测定法： 除高效液相色谱项下规定的两种方法外，亦可采用标准溶液加入法。 AX：供试品中待测组分的峰面积 Ais：加入对照品后待测组分的峰面积 CX：供试品中待测组分的浓度 ΔCX：加入的已知浓度的待测组分对照品的浓度 测定法方法的选择 手工进样：采用内标法 自动进样：采用内标法或外标法 顶空进样：标准溶液加入法 当标准溶液加入法与其他定量方法结果不一致时，应以标准加入法的结果为准。 第三节 药品分析方法的验证 一、准确度 方法测定结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。 药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应的检测要求。验证的内容包括：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。 含量测定方法 原料药的含量测定：用已知纯度的对照品或供试品进行测定，计算回收率。 制剂的含量测定：用含已知量被测物的制剂各组分混合物进行测定，回收率按上式计算。如不能获得制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，回收率则应按下式计算。 杂质定量测定方法 杂质定量测定多采用色谱法，其准确度可通过向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测试。 如不能获得杂质或降解产物，可将本法测试结果与另一成熟的方法进行比较。 应表明单个杂质或杂质总量相当于主成分的重量比（%）或面积比（%）。 数据要求 至少用9个测定结果进行评价； 应报告已知加入量的回收率(%)，或测定结果的平均值与真实值之差及其相对标准偏差或可信度。 二、精密度 在规定的测试条件下，同一均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。 精密度可用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。 标准（偏）差（SD） 偏差（d）：测量值与平均值之差 相对标准（偏）差（RSD) 验证内容 重复性： 在较短时间间隔内，在相同的操作条件下由同一分析人员所测的结果的精密度（批内精密度）。 至少用9个结果进行评价。 中间精密度：在同一实验室，在不同时间，由不同人员用不同设备所测定结果的精密度。 重现性：在不同实验室，由不同人员用不同设备所测定结果的精密度。 数据要求 应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限。 三、专属性 在其他成分可能存在下，采用的方法能准确测定出被测物的特性。 鉴别反应专属性：应能与可能共存的物质或结构相似的化合物区分，不含被测成分的样品均应呈负反应。 含量测定和杂质测定专属性 色谱法和其他分离法，应附代表性图谱，且标明诸成分的位置。 对于含量测定，试样中应加入杂质，考察测定结果是否受干扰。 对于杂质测定，也可向试样中加入一定量的杂质，考察杂质能否得到分离。 在杂质或降解产物不能获得时，可将含有杂质或降解产物的试样进行测定，并与另一个经过验证的方法比较。 四、检测限 (limit of detection, LOD) 试样中被测物能被检测出的最低浓度或量。它反应方法的灵敏度，无需准确定量。 常用方法 目视法： 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。 适用于非仪器分析法（如显色鉴别法、薄层色谱法检测杂质）。 信噪比法： 用已知低浓度样品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠检测出的最低浓度或量。 一般以信噪比S/N =3（或2)时的相应浓度或量确定为检测限。 数据要求 使用5～6份试样，其浓度为近似或等于检测限目标值，进行分析，以可靠地测定检测限。报告应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。 五、定量限 (limitation of quantitation, LOQ) 试样中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确度和精密度。 杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定定量限。 LOQ的测定方法与LOD的方法相同，只是相应的系数不同。LOQ为S/N=10时的相应浓度或量。 六、线性 测试结果（响应值）与试样中被测物的浓度或量直接呈正比关系的程度。 制备至少5份供试品溶液进行测定，以测得的响应值