食品卫生微生物学检验学习..ppt

食品卫生微生物学检验五 大肠菌群测定之四: 观察乳糖发酵管和伊红美蓝平板结果。 结果报告：查MPN检索表，报告MPN值。 实验流程： 微量乳糖发酵管产气（G－无芽胞杆菌）→大肠菌群阳性。 伊红美蓝平板有典型菌落（G－无芽胞杆菌）→粪大肠菌群阳性。 结果报告：根据证实为大肠菌群和粪大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100ml大肠菌群和粪大肠菌群MPN值。 MPN检索表 MPN 为最可能数量(Most Probable Number)的简称。这种方法，对样品进行连续系列稀释，加入培养基中进行培养，从规定的反应呈阳性的管数的出现率，用概率论来推算样品中细菌数最近似的数值。 选择检验稀释度时,在这10倍稀释度系列管中，应该至少使最高稀释度有一管为阴性，以获得最近似的数值。 该表为10倍稀释,只给了三个稀释度，如改用不同的稀释度，则表内数字应相应降低或增加10倍。 假如原来接种1ml×3，0.1 ml×3，0.01 ml×3和0.001 ml×3,得出结果的阳性管数为3-3-2-1。这些结果只有3个数可查MPN值,应选取其中所有管都阳性的最小样品量(此处为0.1 ml)及其后的2个较高稀释度,即选择3-2-1,代表样品容量是0.1,0.01及0.001 ml,从表查知MPN值应为1500，乘以稀释倍数10,即15000。 P17检索表第一列，阳性管数1ml×3管中的1ml，是指实验操作时，10ml乳糖胆盐发酵管加入原液（样品）1ml。如果检样3个稀释度为十倍、百倍和千倍稀释。那么，实际加样量应该是0.1ml×3管,0.01ml×3管，0.001ml×3管。因此，表内数字应相应增加10倍。 例如(P18) 阳性管数3-3-2，MPN = 110000 阳性管数3-3-3，MPN ≥ 240000 ※样品作十倍、百倍和千倍稀释，实验结果的MPN数应增加10倍。 结果报告 微量乳糖发酵管产酸产气（G－无芽胞杆菌）→大肠菌群阳性。伊红美蓝平板有典型菌落（G－无芽胞杆菌）→粪大肠菌群阳性。 根据证实为大肠菌群或粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100ml(g) 大肠菌群或粪大肠菌群的MPN值。 ※我国生活饮用水卫生标准中规定，每毫升水中细菌总数不得超过100个；在100ml水中总大肠菌群不得检出；粪大肠菌群不得检出。 ※如果第一管检样量改用10ml，培养基加多少？ 菌落总数的食品卫生学意义 反应食品被细菌污染的程度 预测食品耐放程度和时间 估测食品腐败状况 实际上是该实验条件下能生长繁殖的致病菌、非致病菌、酵母菌和霉菌等杂菌的总数 实验结果比实际活菌数低 大肠菌群的食品卫生学意义 作为粪便污染食品的指示菌，MPN值愈高说明食品受粪便污染程度愈高。 作为肠道致病菌污染食品的指示菌，MPN值越高说明肠道致病菌存在的可能性越大，但两者之间并不总是呈平行关系。 要求食品中大肠菌群完全不存在是不可能的，重要的是其污染程度、是否超过国家的限量标准。 部分食品微生物限量标准 食品种类 菌落总数 大肠菌群 致病菌 霉菌 （cfu/ml） （个/100ml） （cfu/ml） 饮用纯净水 ≤20 ≤3 不得检出 不得检出 碳酸饮料 ≤100 ≤6 不得检出 - 熟啤酒 ≤50 ≤3 - - 含乳饮料 ≤10000 ≤40 不得检出 - 酸牛乳 - ≤90 不得检出 - 微生物与食物中毒 概念：指摄入了含有生物性、化学性有害物质的食品或把有毒有害物质当作食品摄入后出现得非传染性的急性、亚急性疾病。 特点：潜伏期短，来势急剧，短时多人同时发病；临床表现大致相同；与吃某种有毒食品有关；发病率高，人与人之间并不传染。 分类：微生物性（细菌性、真菌性），化学性，动、植物性，以细菌性最常见。 细菌性食物中毒 概念：由于食入被病原菌或其毒素污染的食物后所引起的以急性肠胃炎为主的疾病。 分类：感染型、毒素型、不定型。 * * 大肠菌群检验程序 检样 ↓ 稀释 ↓ 乳糖胆盐发酵管, 36℃±1℃， 24h±2h ↓ ↓ 不产气 产气 ↓ ↓ 大肠菌群阴性 伊红美蓝琼脂平板,36℃±1℃，24