哺乳动物内质网体中fkbp23与bip结合特异性的分析高分子化学与物理专业论文.docxVIP

南开大学磺土研究生毕业(拳位)论文中文摘要 南开大学磺土研究生毕业(拳位)论文 中文摘要 FKBP23属于索免嚣白(Immunophilin)黎族的成员。亲免蛋白具有两太 主要特征：一是遗传土的保守性，二是腻脯氯螽龟颁反异构酶(PPIase)活性。 BiP是Hsp70家族在鸯餍翘舔中酌成曼。在生命镶中，臻白霞农冀巍理位置需 毒彦交成吴蠢委常生理磅魏戆蜜阚结鼹考葵有活蛙。Hsp70家族萤囊农生拯体走 的主要劝能是在蛋白质于细胞内亚细胞结构间转述的过程及其折叠过程中，充 当分子伴侣的角色。 拳课题采弼亲和吸附法绣合免菠印述《Immunobtot，即Western Blot)馥 裣溺方法，蓄次证明了袁哺嚣动物细藏内震麓俸审鼹踊辞高度傣寄砖簧鸯震 FKBP23舄BiP可以转癸性她结合。通过氨基酸疼列分折，我们分段克隆了 mFKBP23的N端和c端蛋白，并通过上述的实验方法证明了只有mFKBP23 的c端翼有岛BiP特异谯结合的特征，前N端没有炮特征。依据mFKBP23 C 端的EF挚模体结构莫有ca2+戆舍溘褴的耱征，我们遗遘敬变结合缓冲液孛ca2+ 浓度砖蜜验证明了钙嘉等强震磨FKBP23与BiP秘结合孛起蹋节馋髑，薅且实 验缝果表明产生此调节诈用的c矿+浓度的突变点应在2～3 mM之间。为了更加 具体地确定FKBP23与BiP的结合住点，我们翱步探索了mFKBP23的N端和 c端与mBiP的N端和c端之阍交爻结合的情况。虽然群前没有确定酶结论， 但有结暴表明这两个蛋白的N端蔽它们秘c端之闻分躺可以特异幢地结合， 毙结果镑需逡一步嶷验的证实。 通过对哺乳动物内质网体中的亲免髓自FKBP23和热激鬣白BiP结合特异 性的研究，裁们推测FKBP23与BiP结合后，可髋对BiP的ATPase活性具有 调节作用，从而改定BiP每繁盘虞结合的状态，遂旃影喃蛋南质舔囊秘进程。 美犍翅：亲免萤白(immunophilin)；FK506结合萤白23(FKBP23)； 热激蛋白(heat shock protein，Hsp)；免疫球蛋白结合赞白(BiP)； 内质蹲体；蛋巍质靖合特异性 l| 南开大学硕士研究生毕业(学位)论文Abstract 南开大学硕士研究生毕业(学位)论文 Abstract FKBP23 is a member of the family of immunophilins．Immunophilins are highly conserved proteins and they possess the peptidyl—prolyl cis—trans isomerase(PPIase) activity．BiP，which is localized in endoplasmic reticulum(ER)，is a member of the Hsp70(Heat shock protein 70)family．Hsp70 is a very important member of molecular chaperone that plays a role in protein’S transferring between different subcellular structures and protein’S folding to form functional structures in its physiological location． By means of affinity adsorption and immunoblot(western blot)，we testifed for the first time that the two conserved proteins in mammalian endoplasmic reticulum，FKBP23 and BiP，could bind to each other specifically．Based on the animo acid sequence analysis of mFKBP23，we cloned the N-terminal and C-terminal of mFKBP23 and carried on the same experiments as above，the result showed that only the C-terminal of mFKBP23 bound to BiP．It is reported that there are two Ca2+binding motifs(EF—hand)in the C-terminal of mFKBP23．We tested the binding specif