超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定奶粉中的雌激素.PDF

超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定 奶粉中的雌激素 摘 要：本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A 和三重四极杆质谱仪 LCMS-8040 联用测定奶粉中8 种雌激素的方法。样品经提取后，用超高效液相色谱LC-30A 分离，三重四 极杆质谱仪LCMS-8040 内标法进行定量分析。雌三醇、17-雌二醇、炔雌醇和雌酮在1 ~ 100 µg/L 浓度范围内线性良好，17-雌二醇在2 ~ 100 µg/L 浓度范围内线性良好，己烯雌酚、己烷 雌酚和己二烯雌酚在0.5 ~ 500 µg/L 浓度范围内线性良好，对5 µg/L 、10 µg/L 和100µg/L 混合 标准溶液连续 6 次进样，3 个浓度标准品的峰面积和保留时间的相对标准偏差分别在 0.864%~4.843%和0.034%~0.638%之间，仪器精密度良好；同时考察了奶粉空白基质加标结果， 结果显示 8 种样品在定量限上均有很好的响应，方法定量限满足 《GB/T 21981-2008 动物源食 品中激素多残留检测方法液相色谱-质谱质谱法》中的要求。 关键词：雌激素 奶粉 超高效液相色谱仪 三重四极杆质谱仪 雌激素是一类有广泛生物活性的类固醇 物质在动物性食品中不得检出。 化合物，它具有促进和维持女性生殖器官和 同时欧盟第96/22/EC 指令、美国食品药 第二性征的生理作用。作为兽药，雌激素能 品管理局(FDA) 、日本肯定列表也禁止在动物 够使母畜不怀孕产奶或者治疗母畜不孕症。 源性食品中使用激素类药物。本文根据 中华人民共和国农业部2002 年12 月24 日农 《GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残 业部发布了第 235 号公告《动物性食品中兽 留检测方法液相色谱-质谱质谱法》，使用岛 药最高残留限量》，对有关雌激素类的药物 津超高效液相色谱仪 LC-30A 和三重四极杆 作出了明确的规定，规定苯甲酸雌二醇仅做 质谱仪LCMS-8040 联用，建立了快速准确测 治疗药物使用，禁止使用乙烯雌酚及其盐、 定奶粉中雌激素的方法，供相关检测人员参 脂，以及醋酸甲孕酮等物质，并且规定上述 考。 1．实验部分 1.1 仪器 本实验使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A 与三重四极杆质谱仪LCMS-8040 联用系统。具 体配置为LC-30AD×2 输液泵，DGU-20A5 在线脱气机，SIL-30AC 自动进样器，CTO-30AC 柱温箱，CBM-20A 系统控制器，LCMS-8040 三重四极杆质谱仪和LabSolutions Ver. 5.41 色 谱工作站。 1.2 分析条件 液相色谱条件 分析仪器： LC-30A 系统 色谱柱： Shimadzu Shim-pack XR-ODS III 2.0 mmI.D.×75 mmL., 1.6 μm 流动相：A －水；B －甲醇/ 乙腈=1:1(v/v) 流速： 0.4 mL/min 进样体积：10 μL 21 柱温：40 ℃ 洗脱方式：梯度洗脱，B 相初始浓度为45%，时间程序见表1。 表1 梯度洗脱时间程序 Time(min) Module Command Value 1.50 Pumps Pump B Conc. 55 4.00 Pumps Pump B Conc. 60 4.50 Pumps Pump B Conc. 100