鸡屎藤抑制丁酰胆碱酯酶活性及活性部位的UPLc-中国药科大学学报.PDF

学报 ４４ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１３，４４（１）：４４－４８ 鸡屎藤抑制丁酰胆碱酯酶活性及活性部位的 ＵＰＬＣＱＴＯＦＭＳ分析 １ ２ １ １ 王冬梅 ，刘艾琳 ，黄林芳 ，陈士林 １ （中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所，北京１００１９３； ２中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所，北京１０００５０） 摘　要　应用高通量药物筛选技术，筛选发现具有丁酰胆碱酯酶（ＢｕＣｈＥ）抑制活性的中药提取物，同时采用超高效 液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱仪联用技术（ＵＰＬＣＱＴＯＦＭＳ）对其活性部位进行分析和鉴别。药材经石油醚渗 滤、乙醇提取、乙酸乙酯萃取和水煎煮后，得到４个提取部位。采用５，５′二硫双硝基苯甲酸（ＤＴＮＢ）法检测ＢｕＣｈＥ活性， 于４１２ｎｍ波长处检测吸收度，计算提取物对ＢｕＣｈＥ的抑制率。采用ＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣＢＥＨＣ 色谱柱，以水甲醇为流动 １８ 相梯度洗脱，２００～４００ｎｍ扫描，使用ＥＳＩ离子源，在正离子模式下采集数据。结果显示，５７种中药提取物中，鸡屎藤的乙酸 乙酯部位显示较强的ＢｕＣｈＥ抑制活性，并从其活性部位中分析鉴定出９个化合物，主要成分为环烯醚萜苷类化合物，分别 是鸡屎藤苷、鸡屎藤苷酸、甲基鸡屎藤苷、咖啡酸４ＯＤ吡喃葡萄糖鸡屎藤苷Ｂ和４个未知的环烯醚萜苷类，以及１个黄 β 酮类成分蒙花苷。表明鸡屎藤乙酸乙酯提取部位具有较强的ＢｕＣｈＥ抑制活性，ＩＣ 为１２４１５ ｇ／ｍＬ，ＱＴＯＦＭＳ测定的相 ５０ μ 对分子质量及正离子信息鉴定鸡屎藤乙酸乙酯提取物中主要为环烯醚萜类成分，说明其含有的环烯醚萜苷类为抑制 ＢｕＣｈＥ活性的主要成分，为进一步研究鸡屎藤活性成分奠定基础。 关键词　鸡屎藤；丁酰胆碱酯酶抑制剂；高通量筛选；提取物；有效成分；ＵＰＬＣＱＴＯＦＭＳ 中图分类号　Ｒ２８４１　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１３）０１－００４４－０５ Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｐａｒｔｏｆａｎｔｉｂｕｔｙｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔ ｅｒａｓｅｏｆＰａｅｄｅｒｉａｓｃａｎｄｅｎｓ牗ｌｏｕｒ牘ＭｅｒｒｂｙＵＰＬＣＱＴＯＦＭＳ １ ２ １ １ ＷＡＮＧＤｏｎｇｍｅｉ牞ＬＩＵＡｉｌｉｎ牞ＨＵＡＮＧＬｉｎｆａｎｇ 牞ＣＨＥＮＳｈｉｌｉｎ １ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ牞ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ＆ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ牞Ｂｅｉｊｉｎｇ ２ １００１９３牷ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ牞ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ＆ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ牞Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００５０牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｈｉｇｈｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｄｒｕｇｓｃｒｅｅｎｉｎｇｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｂｕｔｙｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ牗ＢｕＣｈＥ牘ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂｅｘｔｒａｃｔｓａｎｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄｏｕｔ．ＴｈｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｎＰａｅｄｅｒｉａ ｓｃａｎ