生物分子实验教材 翟朝阳主编.pdfVIP

第 1 页 凝 集 反 应 【原理 】 凝集反应是一种抗原抗体反应，在一定条件下发生 。直接凝集反应是颗 粒性抗原与相对应 的抗体在有 电解质存在 的情况下发生的反应，以出现肉眼 可见的凝集现象为特征 。间接凝集反应则是先将抗原吸附在某种载体上 （多 种物质可充当吸附抗原的载体 ），再与抗体进行反应而 出现凝集现象。间接 凝聚反应还可 以用抑制 的方式 （间接凝集抑制实验 ）来进行 。另有一种间接 凝集反应是将抗体 吸附在载体上 ，与抗原进行反应 ，同样也会产生凝集现 象，被称为反 向间接凝集反应 。发生直接凝集反应 的抗原一般较大 ，如细 菌。利用凝集反应可 以鉴定未知的抗原，阳性反应强度一般用 “ ”的数量 表示。在一定条件下，可以利用凝集反应做半定量测定。 直接凝集反应 （玻片法 ） 直接凝集反应是用已知抗体 （如免疫血清）测定未知抗原的反应。 细菌鉴定 【材 料 】 沙 门氏菌多价诊断血清 。两种血清都做 志贺 氏菌多价诊断血清， ： 稀释 。 待测菌培养于平皿或斜面，培 养 第 2 页 生理盐水，载玻片，接种环。 【方法 】 取一张洁净的载玻片，用笔划分成 格 ，编号 。 用灭菌接种环取志贺 氏菌多价诊断血清 环放于第 格 ；在酒精 灯上将接种环烧灼灭菌并冷却后再取 环沙 门氏菌多价诊断血清放在第 格 ；同法灭菌后取 环生理盐水放于第 格 。 接种环灭菌后取待测菌，分别与血清和生理盐水混合 。每次取菌与 一种材料混合后都需要在火焰上将接种环烧灼灭菌，再进行取菌，否则会造 成血清之间的污染而使反应的特异性和正确性受到影响。 轻摇载玻片，使各样 品混合，几分钟后，在光线斜射下观察结果 。 加有细菌的实验组与加生理盐水的对照组应有明显区别，后者没有任何反应 迹 象 。 【结果 】 阳性实验组有 白色块状凝集物出现，阴性为无任何凝集现象出现。出现 凝集的实验组，其抗原菌是与诊断血清抗体相应的细菌。 【注】 本实验也可 以在试管中进行 ，将免疫血清做 系列稀释 ，再与细菌 进行混合 。设生理盐水对照组 。将混合后 的样 品置 孵箱过夜，第 天 观察结果。 血型鉴定 【材料 】 抗 血清，抗 血清 。 碘 附。 载玻片，采血针 ，棉签，牙签。 第 3 页 【方法 】 取一张洁净的载玻片，用笔划分成 格 ，编号 。 在第 格滴入抗 血清 ，第 格滴入抗 血清。 用碘 附将左手无名指尖消毒后 ，迅速用采血针扎一下，将血滴入载 玻片第 格和第 格的血清中，用牙签轻轻混匀一下， 后观察结果。 【结果 有凝集物 出现者为 阳性 ，用 “＋”表