健胃补脾汤抗小鼠乙醇性胃黏膜损伤作用的研究-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

泰山医学院硕士学位论文 泰山医学院硕士学位论文 万方数据 万方数据 健胃补脾汤抗小鼠乙醇性胃黏膜损伤作用的研究 研究生：林 辉 专 业：病理学与病理生理学 导 师：柳雅玲 教授 中文摘要 目的： 本课题通过动物实验，观察方剂健胃补脾汤对乙醇性小鼠胃黏膜损伤保护作用及 相关作用机制，探究健胃补脾汤发挥保护作用的可能机制，为健胃补脾汤对乙醇性胃 黏膜损伤保护作用的分子机制提供直接的实验依据，并且为乙醇性胃黏膜损伤性胃溃 疡（GU）的预防与治疗提供新的药物防治思路，为临床治疗乙醇性胃黏膜损伤类疾病 提供指导和客观依据。 材料与方法： 1、清洁级（II 级）健康小白鼠 96 只，体重 25-30g 不等，雌雄各半，由浙江中 医药大学实验中心提供。将其称重后编号，随机分成 6 组，每组雌雄各半，分别为正 常对照组、模型对照组、阳性对照组(给予灌胃对胃黏膜损伤有保护作用的西咪替丁)、 保护组（包括中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组三组），每组小鼠均为 16 只。 2、建立小鼠乙醇性胃黏膜损伤模型。正常对照组给予动物生理盐水灌胃 7 天， 剂量 8ml/kg 鼠重；模型对照组首先给予动物生理盐水灌胃两天，剂量 8ml/kg 鼠重， 于第三天开始灌胃 55%的乙醇，每天给药一次，8ml/kg 鼠重，连续 5 天；阳性对照 组给予 Cim7mg/Kg，其剂量由临床常用剂量折算得来。该剂量为大量文献常用剂量， 已获得认可剂量。中药保护组：分别给予小鼠低、中、高剂量（3ml/kg，6ml/kg，9ml/kg） 的健胃补脾汤灌胃 7 天，于第 3 天灌胃健胃补脾汤预保护后 2h 开始灌胃 55%乙醇， 每天给药一次，连续 5 天。上述各组按照描述给药方法连续给药 7d，每日一次。在 第六天灌胃结束后，立即实施禁食不禁水 24h。处死，从病理形态学进一步观察健胃 补脾汤对乙醇致小鼠胃黏膜损伤的保护作用，并检测各组小鼠血清中一氧化氮（NO）、 血浆前列腺素 E2（PGE2）以及Ⅱ相酶中醌还原酶（quninone reductase,QR）的含量， 探讨健胃补脾汤防治小鼠乙醇性胃黏膜损伤的相关分子机制。 3、应用免疫组化法检测小鼠胃黏膜组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的平均 1 光密度值的变化，根据其数值的变化，来探讨健胃补脾汤发挥作用的调控机制。 4、进行 Pearson 相关性分析，分析健胃补脾汤与小鼠血清 NO、PGE2、QR 浓度 及胃黏膜 iNOS 平均光密度值变化的相关性。 结果： 1、根据动物实验所得损伤率及损伤抑制率，可得出阳性对照组以及各中药治疗 组均能显著抑制小鼠乙醇性胃黏膜损伤的发生，中药中剂量组与中药高剂量组对乙醇 性胃黏膜损伤的抑制作用均明显强于阳性对照组（p＜0.05），具有统计学意义。 2、通过对健胃补脾汤对小鼠血清中 NO 含量变化的分析，可得知血清 NO 含量， 模型对照组与中药低剂量治疗组血清中 NO 含量明显低于正常对照组，且具有统计学 意义（p＜0.05）；中药低剂量组血清 NO 含量虽然高于模型对照组，但是不具有统 计学意义（p＞0.05）；正常对照组、阳性对照组、中药中、高剂量组血清 NO 含量 比模型对照组要高，且具有统计学意义（p＜0.05）；与阳性对照组相比，中药中、 高剂量组血清 NO 含量升高，且具有统计学意义（p＜0.05）。说明中、高剂量的健 胃补脾汤能使 NO 含量升高，从而起到对乙醇性胃黏膜损伤的保护作用。 3、通过对健胃补脾汤对小鼠血清中 PGE2 含量变化的分析，可得知血清 PGE2 含 量，模型对照组与中药低剂量治疗组血清中 PGE2 含量明显低于正常对照组，且具有 统计学意义（p＜0.05）；中药低剂量组血清 PGE2 含量虽然高于模型对照组，但是不 具有统计学意义（p＞0.05）；正常对照组、阳性对照组、中药中、高剂量组血清 PGE2 含量比模型对照组要高，且具有统计学意义（p＜0.05）；与阳性对照组相比，中药 中、高剂量组血清 PGE2 含量升高，且具有统计学意义（p＜0.05）。说明中、高剂量 的健胃补脾汤能使 PGE2 含量升高，从而起到对乙醇性胃黏膜损伤的保护作用。 4、通过对健胃补脾汤对小鼠血清中 QR 含量变化的分析，可得知血清 QR 含量， 模型对照组与中药低剂量治疗组血清中 QR 含量明显低于正常对照组，且具有统计学 意义（p＜0.05）；中药低剂量组血清 QR 含量虽然高于模型对照组，但是不具有统 计学意义（p＞0.05）；正常对照组、阳性对照组、中药中、高剂量组血清 QR 含量 比模型对照组要高，且具有统计学意义（p＜0.05）；与阳性对照组相比，中药中、 高剂量组血清 QR 含量升高，且具有统计学意义（p＜0.05）。说明中、高剂量的健 胃补脾汤能使