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研究生签名旁Il穆吟导师签
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石日
甲状腺功能减退大鼠大脑皮质氧化应激及神经元型
甲状腺功能减退大鼠大脑皮质氧化应激及神经元型 一氧化氮合酶神经元的变化及意义
摘 要
目的:研究药物性甲状腺功能减退大鼠大脑皮质氧化应 激及神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase, nNOS)神经元的变化及意义,探讨其参与甲状腺功能减退脑 损害的可能作用。
方法:Sprague.Dawley(SD)雄性大鼠42只,体重1 80-
220 g,随机分为对照组18只和甲状腺功能减退组(甲减组) 24只。甲减组给予丙基硫氧嘧(Propylthiouracil,PTU)连 续灌胃制备甲减动物模型。将丙基硫氧嘧啶溶于蒸馏水中, 甲减组大鼠每天按每100 g体重给予20 mg丙基硫氧嘧啶, 计算相应的剂量。对照组每日给予等量的生理盐水灌胃。所 有动物饲以普通饲料,自由饮水和进食。每周定时称量体重 一次,调整丙基硫氧嘧啶剂量。分别于25天、45天、60天 宰杀大鼠。宰杀前用三等分Y型迷宫测定大鼠学习能力。宰 杀时股动脉取血5 ml,2000 r·min。1离心10 min,取血清置于
.20℃冰箱保存,待测血甲功三项(FT3、FT4、U.TSH)。开 颅取出脑组织,用冷生理盐水冲洗脑组织3次,去除血污,用 冰浴PH=7.40的磷酸盐缓冲溶液(PBS)按10:1比例配制成 10%脑组织匀浆液,然后将混悬液移入离心管,以4000 r/min 离心1 5 rain,取上清液,.70。C冻存,待测大脑皮质谷胱甘肽过 氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH.Px)、超氧化物歧化 酶(Superoxidedismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,
中文摘要MDA)、一氧化氮(Nitric
中文摘要
MDA)、一氧化氮(Nitric oxide,NO)的活性;同时对大脑 皮质用4%中性多聚甲醛液固定,常规石蜡包埋、切片,用免 疫组织化学SABC结合计算机图像分析技术,动态观测甲减 大鼠大脑皮质nNOS阳性神经元平均截面积和灰度值的变 化。
结果:①两组大鼠一般情况比较:对照组大鼠体质量增 加较快,摄食饮水量多,反应灵敏,活动性强,毛发有光泽, 声音清亮:甲减组大鼠体质量增加慢,摄食饮水量较少,反应 迟钝,行动迟缓,毛发稀疏无光泽,声音嘶哑。且随着甲减 病程进展,甲减大鼠体重逐渐减轻。②对照组与甲减组大鼠 学习能力的比较:甲减组较对照组所需电击次数明显增多(尸
O.05),学习能力下降。③两组大鼠甲状腺功能的比较:25
天甲减组大鼠血FT3、FT4水平较对照组显著降低(KO.05),
U—TSH水平较对照组显著升高(P0.05),表明甲状腺功能 减退大鼠造模成功;45天及60天甲减组大鼠血FT3、FT4水平 较同期对照组显著降低(PO.01),U.TSH水平较对照组显 著升高(P0.01)。④对照组与甲减组大鼠大脑皮质氧化应激 指标的比较:25天甲减组大鼠大脑皮质GSH.Px、SOD的活性 较同期对照组降低(尸O.05),45天、60天甲减组大鼠大脑 皮质GSH.Px、SOD的活性较同期对照组降低(PO.01)。且 随甲减病程进展,呈进行性降低。25天甲减组大鼠MDA、 NO活性较同期对照组明显升高(尸O.05),45天、60天甲减 组大鼠MDA、NO活性对同期对照组明显升高(尸0.01)。 随甲减病程进展,MDA、NO活性呈进行性升高。⑤光镜及 计算机图像分析观察结果:nNOS阳性神经元在大脑皮质散 在分布,多呈圆形、卵圆形、梭形和三角形:胞体较大,突
中文摘要起明显,免疫组化染色使胞质和突起呈棕褐色,胞核不着色:
中文摘要
起明显,免疫组化染色使胞质和突起呈棕褐色,胞核不着色: 25天甲减组nNOS阳性神经元较对照组染色程度加深,灰度 值较对照组下降,有统计学意义(尸O.05),且45
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