间充质干细胞培养上清液抑制成纤维细胞的衰老-江苏大学.PDF

第２９卷第１期 江 苏 大 学 学 报（医学 版） Ｖｏｌ．２９ Ｎｏ．１ 　 ２０１９年１月 　 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃｉｎｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｊａｎ．２０１９ 　 　 　 　 　 　 间充质干细胞培养上清液抑制成纤维细胞的衰老 赵传祥，李宏慧，汤思熠，吴仪，李慈，高凤威，周婧文，仇欣，张燕，夏圣 （江苏大学医学院，江苏 镇江２１２０１３） ［摘要］　目的：探讨人脐带间充质干细胞培养上清液对人皮肤成纤维细胞的抗衰老作用。方法：将原代人皮肤成 纤维细胞分为正常对照组、ＨＯ组、培养上清液组和ＨＯ ＋培养上清液组。其中，ＨＯ组和ＨＯ ＋培养上清液组 ２ ２ ２ ２ ２ ２ ２ ２ 中细胞皆采用２００ ｍｏｌ／ＬＨＯ预先处理，以诱导细胞衰老模型。采用 半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞 半乳 μ ２ ２ β β 糖苷酶活性；ＤＡＰＩ染色检测细胞核体积变化；采用实时荧光定量ＰＣＲ法（ＲＴｑＰＣＲ）检测细胞中Ｐ５３和Ｐ２１的ｍＲ ＮＡ转录水平；蛋白质印迹检测Ｐ５３蛋白表达。结果：与正常对照组相比，ＨＯ处理后与细胞衰老相关的 半乳糖 ２ ２ β 苷酶活性明显增强、半乳糖苷酶阳性细胞百分比明显增多（Ｐ＜０．０５）；细胞核体积明显变大，衰老细胞明显增多 β （Ｐ＜０．０５）；Ｐ５３和Ｐ２１ｍＲＮＡ转录水平明显升高（Ｐ＜０．０５），并且Ｐ５３蛋白表达增强。经间充质干细胞培养上清 液处理后，上述衰老相关指标均明显改善（Ｐ＜０．０５）。结论：人脐带间充质干细胞培养上清液可抑制ＨＯ诱导的 ２ ２ 成纤维细胞衰老进程。 ［关键词］　间充质干细胞；抗衰老； 半乳糖苷酶；皮肤成纤维细胞 β ［中图分类号］　Ｒ３２９．２　　［文献标志码］　Ａ　　［文章编号］　１６７１－７７８３（２０１９）０１－００１２－０５ ＤＯＩ：１０．１３３１２／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１７７８３．ｙ１８０２３１ ［引用格式］赵传祥，李宏慧，汤思熠，等．间充质干细胞培养上清液抑制成纤维细胞的衰老［Ｊ］．江苏大学学报（医 学版），２０１９，２９（１）：１２－１６． Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｉｎｈｉｂｉｔｓｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅｏｆｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ＺＨＡＯＣｈｕａｎｘｉａｎｇ，ＬＩＨｏｎｇｈｕｉ，ＴＡＮＧＳｉｙｉ，ＷＵＹｉ，ＬＩＣｉ，ＧＡＯＦｅｎｇｗｅｉ， ＺＨＯＵＪｉｎｇｗｅｎ，ＱＩＵＸｉｎ，ＺＨＡＮＧＹａｎ，ＸＩＡＳｈｅｎｇ （ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＺｈｅｎｊｉａｎｇＪｉａｎｇｓｕ２１２０１３，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｃｏｒｄｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｏｎａｇ