十六烷基三甲基溴化铵／山梨醇酐硬脂酸酯微乳液凝胶固定-应用化学.PDF

第２８卷 第４期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．２８Ｉｓｓ．４ ２０１１年４月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ａｐｒ．２０１１ 十六烷基三甲基溴化铵／山梨醇酐硬脂酸酯微乳液凝胶 固定化脂肪酶的催化活性及立体选择性  王　晶　宋少芳 　路福绥 （山东农业大学化学与材料科学学院　泰安２７１０１８） 摘　要　制备了能在水溶液中长时间稳定存在的十六烷基三甲基溴化铵／山梨醇酐硬脂酸酯（ＣＴＡＢ／Ｓｐａｎ ６０）微乳液凝胶（ＭＢＧ），确定了Ｓｐａｎ６０在乳化剂ＥＭ（正丁醇与Ｓｐａｎ６０的混合物）中的质量分数范围；分别 以正己酸与正己醇的酯化反应、单硬脂酸甘油酯的水解反应、消旋布洛芬与正辛醇的不对称酯化反应为指 α 示反应，研究了ＣＴＡＢ／Ｓｐａｎ６０ＭＢＧ固定化脂肪酶的催化活性及立体选择性。结果表明，Ｓｐａｎ６０在ＥＭ中的 质量分数小于５７％时可形成机械强度较好的ＣＴＡＢ／Ｓｐａｎ６０ＭＢＧ；其固定化脂肪酶在有机溶剂中的酯化活性 随ＥＭ中Ｓｐａｎ６０含量的增加先是逐渐增大，３５％时最大，后又逐渐小幅度降低，在所考察的Ｓｐａｎ６０含量范 围内均比在ＣＴＡＢＭＢＧ中高；在水溶液中固定化脂肪酶能顺利催化 单硬脂酸甘油酯的水解反应，２４ｈ后反 α 应转化率不再随反应时间的延长而增加，其水解活性在重复使用９次后仅降低 １３６８％，表明ＣＴＡＢ／Ｓｐａｎ６０ ＭＢＧ固定化脂肪酶能够顺利进行分离并重复使用；此体系的脂肪酶也选择性地催化生成Ｓ构型布洛芬辛酯， 产物对映体过量值（ｅｅ）随反应的进行缓缓下降，但降幅不大，即其立体选择性要比在 ＣＴＡＢＭＢＧ中高。因 ｅ 此，ＣＴＡＢ／Ｓｐａｎ６０ＭＢＧ作为脂肪酶固定化载体既可用于有机溶剂中又可用于水溶液中的生物合成与生物转 化反应，扩大了微乳液凝胶固定化脂肪酶的应用范围。 关键词　微乳液凝胶，固定化脂肪酶，催化活性，立体选择性，反应转化率，对映体过量值 中图分类号：Ｏ６４８．２；Ｏ６２９．８　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１１）０４０４２６０６ ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１０９５．２０１１．００２３７ 酶作为生物催化剂，有许多化学催化剂不可比拟的优点，如催化效率高、反应条件温和和立体选择 性好等等。在科学研究或工业生产催化反应中，酶能否顺利分离与重复使用是能否降低成本的关键。 不论是在水溶液、有机溶剂还是微乳液介质中，酶的分离和重复使用均比较困难。微乳液凝胶（ＭＢＧ）是 ［１２］ 由微乳液、明胶和水在一定条件下形成的有机胶 ，是 １９世纪８０年代末发现的一种酶固定化载体。 ［３４］ Ｒｅｅｓ等 曾利用这一载体对脂肪酶进行固定，并对其酶学性质进行了研究。微乳液凝胶固定化脂肪酶 不仅保持了较高的催化活性和立体选择性，而且具有其他固定化技术不可比拟的优点，如能在分子状态 分散催化剂、产物易于分离、酶能够重复使用等。因此，微乳液凝胶作为酶固定化载体一经出现，就得到 了人们的重视，国内外有许多实验室和研究机构对此进行了多方面的研究。制备微乳液凝胶必须使用 ［５］ 离子型表面活性剂 ，目前使用较多的是琥珀酸二异辛酯磺酸钠（ＡＯＴ）、十六烷基三甲基溴化铵 ［６１０］ （ＣＴＡＢ）及卵磷脂等 。仅含离子型表面活性剂及醇类助表面活性剂的微乳液凝胶在非极性有机溶 剂中可长时间浸泡而其外观不发生明显的变化，但在水溶液中则会发生坍塌，使固定化酶在水溶液中的 应用受到限制。因此，制备能在水溶液中稳定存在的微乳液凝胶显得尤为重要。含有非离子表面活性 剂山梨醇酐硬脂酸酯（Ｓｐａｎ６０）的ＣＴＡＢＭＢＧ在水溶液中能长时间稳定存在，浸泡４８ｈ