云南省不同地区滇重楼皂苷含量对比和影响因子研究.docxVIP

云南省不同地区滇重楼皂昔含量对比和影 响因子研究 ［摘要］用HPLC对采自云南省不同地区的22份滇 重楼样品进行6种皂昔I, II, VI, VH, PA, H含量测定， 用SPSS 17.0进行数据分析不同产区对皂昔含量的影响；结 果表明滇重楼生长的海拔对皂昔含量的影响并不显著，而生 长地区对皂昔含量影响较为显著，滇西的滇重楼明显高于其 他各产区，具有明显的地区依赖性。 ［关键词］滇重楼；皂昔；含量；地理位置；海拔 ［收稿日期］2013-07-18 ［基金项目］中央公益性科研院所基本科研业务专项 (YN-0902) ［通信作者］*高微微，研究员，博士生导师，E-ina订： wgao41 l@sina? com ［作者简介］李海涛，助理研究员，主要从事药用植物 资源生态学研究，Tel :, E-mail : lhtxyl@126. com 滇重楼 Paris polyphylla var. yunnanensis 为延龄草 科Trilliaceae重楼属Paris多年生草本植物，主要分布于 我国云南、四川和贵州一带，常生长在海拔1 400?3 100 m 的常绿阔叶林、云南松林、竹林、灌丛或草坡中，是我国西 南地区的重要药材[1],具有极大的开发前景。滇重楼是《中 国药典》(2010年版)重楼药材的主要的来源植物，具有抗 癌、清热解毒、消肿止痛和止血等作用，治疗跌打损伤有独 特疗效，是“云南白药”、“季胜德蛇药片”、热毒清” 和“宫血宁”等多种中成药的主要原料之一 [2]。 重楼中的脩体皂昔是其主要的活性成分，现代药理学研 究证明其具有良好的抗肿瘤活性[3-5] o近年来市场对滇重 楼的需求量急剧上升，由于长期过度采挖，野生资源锐减， 滇重楼的人工栽培技术研究逐渐展开，规模化种植成为制药 企业的发展趋势。滇重楼的药用成分一一总皂昔含量受地理 环境、土壤和气候的影响而存在差异，加之滇重楼生长缓慢, 种子萌发到收获利用要10多年时间，从而导致重楼质量的 不稳定。本研究通过对云南省滇重楼主要分布区的样品中偏 诺类皂昔(VI, vn, PA, H)和薯裁皂昔类皂昔(I , II) 共6种皂昔的含量进行分析，以确定不同地区滇重楼的品质 差异，并分析影响皂昔含量的主要地理因子，旨在为选育优 良品种和选择合适人工种植地提理论供依据，以提高滇重楼 的药材的产量和质量。 1材料 试验材料主要来自云南省滇重楼的主要产区，即以玉溪 地区为代表的滇中高原区，大理、丽江、香格里拉及高黎贡 山一线的滇西地区，普洱以南的滇南地区，靠近广西和越南 的红河文山一带的滇东南地区。采集时间为滇重楼的花期， 以准确鉴定物种，共采集到滇重楼样本25份，记录植株当 地的地理、土壤和气候特征的相关数据，采集地信息见表1。 标本经中国科学院昆明植物研究所纪运恒副研究员和云南 白药集团赵廷周工程师鉴定。 高效液相色谱仪(Agilent 1100),自动进样器，DAD检 测器。乙睛为色谱纯，水为三蒸水。重楼皂昔I, II, VI, VII对照品购自中国食品药品检定研究院(批号 111590-200402 , 111591-200402 , 111592-200402 , 111593-200402)；重楼皂昔PA, H (纯度99%)对照品购于 中国科学院昆明植物研究所。 2方法与结果 2.1样品处理 新鲜植株采集后除去泥沙，40 C烘干, 粉碎，备用。 2. 2 色谱条件 Agilent SB-C18 (4. 6 mmX250 mm, 5 um)；流动相为乙月青(A)-水(B),梯度洗脱，0?10 min, 5%?20% A, 10?50 min, 20%?42%A, 50?90 min, 42%? 80%A, 90?100 min, 80%?95%A,洗脱时间为 100 min；检 测波长203 nm；体积流量1. 0 mL ? min-1；柱温30 °C,进 样量10 uLo 2.3线性关系分别取在40 °C下干燥的重楼皂昔1,11, VI, vn, PA, H对照品适量，精密称定，用甲醇制成0.4g- L-1 的对照品溶液，分别进样4, 12, 14, 16, 20 uL,得到回 归方 程为：A I =561. 18C I +16. 2 , r=0. 999 8 ； AII =39. 73CII+14. 4, r=0. 999 4； AVI=645. 07CVI+13. 2 , r二0.999 2 ； AVD二462. 4 , CVn+19. 8 , r二0. 999 5 ； APA=603. 16CPA+20. 1 , r=0.999 7 ； AH=617. 69CH+14.6 , r=0.999 3O 2.4精密度，稳定性，重复性，回收率