埃希菌属及其鉴定.doc

PAGE PAGE 1 埃希菌属及其鉴定 本属以大肠埃希菌为代表种。 1．细菌特性 大肠埃希菌为革兰阴性杆菌，直杆状，周鞭毛，能运动，有菌毛。 具有O抗原、H抗原、K抗原，其血清型别按O∶K∶H的顺序排列，以数字表示，如O111∶K58∶H2；O157∶H7等。 兼性厌氧，营养要求不高，菌落为灰白色、圆形，在肠道选择培养基上能发酵乳糖产酸形成不同颜色的菌落。 生化特征为：发酵多种糖类产酸产气，KIA：AA+-，脲酶-；IMViC++--。 2．临床意义 大肠埃希菌是临床最常见的革兰阴性杆菌，也是医院感染常见病原菌，可引起各种肠道外感染和肠道内感染。引起肠道内感染的亦称为致腹泻大肠埃希菌，分为五组： （1）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）ETEC致病机制主要通过产生LT和ST肠毒素导致腹泻和中毒症状，是旅游者腹泻和婴幼儿腹泻的常见病因，导致恶心、腹痛、低热和类似轻型霍乱的急性水样腹泻。 （2）肠致病性大肠埃希菌（EPEC）是婴儿腹泻的重要病原菌，可导致发热、呕吐、严重水泻和粘液便，常引起婴儿脱水性酸中毒。 （3）肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）与志贺菌有共同抗原，可引起类似志贺菌肠炎的症状，如发热、腹痛、水泻或典型菌痢的里急后重症状，并出现脓血粘液便。 （4）肠出血性大肠埃希菌（EHEC）主要血清型为O157∶H7，引起出血性结肠炎（HC）。表现为腹痛、水泻、血性便。主要见于婴幼儿。以暴发流行为主。O157∶H7感染者中有少部分可发展成为溶血性尿毒综合征（HUS），出现溶血性贫血、血小板减少性紫癜和急性肾功能不全。 （5）肠凝聚性大肠埃希菌（EaggEC）引起婴儿急性或慢性水样腹泻伴脱水，偶有腹痛、发热与血便。 3．微生物学检验 （1）标本采集无菌方法采集各类感染标本及时送检；粪便标本宜采集新鲜、有脓血、粘液的部分。 （2）检验方法 1）显微镜检查为革兰阴性杆菌。 2）分离培养标本接种于BAP、SS、MAC/EMB培养基、或增菌培养基，置35℃孵育18～24h，观察菌落。尿液培养须作菌落计数。 3）鉴定与鉴别 ①肠道外大肠埃希菌：本菌因发酵乳糖产酸在MAC上为红色菌落，在EMB上为紫黑色菌落。生化特性如符合即可鉴定为大肠埃希菌。 ②肠道内大肠埃希菌：致腹泻大肠埃希菌的基本生物学特性与肠道外大肠埃希菌相似，但分别具有特殊的血清型、肠毒素或毒力因子。因此，须通过不同的方式来鉴定种、型。 ETEC：主要通过测定ST和LT肠毒素来鉴定。须用生物学方法（兔肠结扎试验，乳鼠灌胃试验、细胞培养等）、免疫学或分子生物学方法来检测。 EPEC：用EPEC分型血清作O∶H分型。 EIEC：用EIECO∶H血清进行分型；毒力试验为豚鼠眼结膜试验。与志贺菌主要鉴别试验是醋酸钠、葡萄糖铵和黏质酸盐试验，EIEC均为阳性，而志贺菌均为阴性。 EHEC：可用EHECO∶H血清进行分型。美国CDC已建议将O157∶H7血清型列为常规检测项目。 EaggEC：采用液体培养-凝集试验或DNA探针检测。 4．耐药性 大肠埃希菌的耐药性主要表现在产生超广谱b-内酰胺酶（ESBL）。产ESBL细菌对青霉素类、第1、2、3代头孢菌素及单环菌素耐药，仅对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂（克拉维酸）敏感。