HBV DNA与HBVm的检测及临床应用评价.doc

PAGE PAGE 1 HBVDNA与HBVm的检测及临床应用评价 洪延山吴健郎洪雅丽 HBVDNA分子杂交试验是目前诊断乙型肝炎、判断病毒复制和评价患者肝脏病变、预后及药物疗效的重要指标之一，目前国内外已普遍应用于临床。为进一步了解HBVDNA检测的实用价值及临床意义，我们对5974份血清标本，同时用ELISA检测HAVIgM、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、及应用非放射性斑点杂交技术检测HBVDNA，对检测结果及临床应用作出评价。 　　材料和方法 一、材料 　　5974份血清标本来自1994年1月～12月到我科作甲、乙型肝炎血清标志检测者标本，其中门诊标本4002份，住院标本1021份，体检标本951份。所有标本均为随机抽样而未作任何选择，在作甲、乙型肝炎血清标志检测的同时，进行HBVDNA分子斑点杂交试验。 二、试剂与方法 　　㈠、甲乙型肝炎血清标志检测试剂均采用厦门新创科技有限公司提供的ELISA药盒，按说明书操作。判断结果全部采用华东电子管厂生产的DG3022-A型酶联免疫检测仪自动打印结果。所有检测结果均输入微机FOXBASE数据库管理系统进行统计。 　　㈡、HBVDNA杂交试验：药盒由上海医科大学预防医学研究所提供，按说明书操作。 　　 结果 5974份血清标本的HBVDNA及甲、乙型肝炎血清标志的检测结果如附表。　　附表　５９７４例甲乙型肝炎血清标志检测结果 ＨＢＶ血清标志例HBVDNAHAVIgM HBs抗-HBe抗-抗-数阳性(％)　阳性　(％) AgHBsAgHBeHBc数数 ＋　－　＋　－　＋1843152282.55432.33 ＋　－　－　＋　＋1824995.43694.00 ＋　－　－　－　＋435398.97102.30 ＋　－　＋　－　－　362877.7800.00 －　＋　－　－　＋56220.368815.66 －　＋　－　－　－21010.482411.43 －　＋　－　＋　＋30910.325317.15 －　－　－　＋　＋16900.001810.65 －　－　－　－　＋　34910.295515.76 －　－　－　－　－23700.004418.57 合计5974169328.344046.76 　　一、从附表可见，5974份血清标本的HBV血清标志阳性者中，其HBVDNA的阳性率分别是：HBeAg(82.49%)大于HBsAg(40.79%)大于抗HBc(29.94%)大于抗HBe(4.34%)大于抗HBs(0.37%)。 　　二、从附表也可见，10种HBV血清标志模式HBVDNA阳性率与HAVIgM阳性率约成反比，即如HBVDNA阳性率越高，其HAVIgM的阳性率就越低，反之则越高。 　　三、从附表还可见，表面抗原阳性的前４种HBV血清标志模式其急性甲肝合并感染率很低为2.95％(122/4138)，而表面抗原阴性的后６种HBV血清标志模式的急性甲肝合并感染率却较高为15.36%(282/1836)，两者比较X=13.75Plt;0.01相差极为显著，其原因尚待进一步探讨。 　　讨论 　　一、Berninger采用密度梯度离心技术发现：HBVDNA阳性血清其DNA与Dane氏颗粒具有相同的密度梯度，故HBVDNA阳性即反映有复制完整HBVDNA颗粒存在。而HBsAg又是HBV核心颗粒的主要结构蛋白之一，其合成受HBV遗传编码所控制。有学者报道当孕妇血清中HBVDNA水平很高时(gt;80pg/10μl)，虽经采取母婴阻断措施，仍可发生母婴传播。有报道HBVDNA与HBeAg密切相关，认为HBVDNA和HBeAg都是评价患者的传染性的重要指标。本文的检测结果，82.49％的HBeAg阳性血清中检出HBVDNA，符合以上观点。 　　从上述检测结果可见，如果单凭HBeAg阳性或单凭HBVDNA阳性来判断乙型肝炎患者的传染性，将会漏掉15％左右具有传染性乙型肝炎患者。因此我们认为应把HBeAg和HBVDNA结合起来，两者只要有一项阳性就应考虑其具有传染性。只有这样才能把的预防、隔离及治疗工作做彻底。 　　二、近来有文献指出：在部份HBsAg及抗-HBe阳性的乙肝患者血清中HBVDNA也阳性。因此认为，抗HBe阳性只能说明病毒复制程度减低，而不能代表复制停止，病情有可能反复。我们在1824例HBsAg及抗HBe同时阳性的血清中有99例 HBVDNA阳性，阳性率5.43％也反映以上观点。所以我们认为在判断乙型肝炎的预后，HBVDNA比HBeAg更敏感而特异。当乙肝病毒清标志物检测结果为HBeAg阴转，而抗-HBe阳转还不能乐观，只有在HBeAg与HBVDNA同时阴转时，病情才可能是较隐定的康复期。因此把HBVDNA列入常规检查，将更能准确、更全