巴戟天各炮制品及不同提取部位对小鼠的急性毒性比较初步探讨.docxVIP

巴戟天各炮制品及不同提取部位对小鼠的急性毒性比较初步探讨 务必论著栏目 巴戟天各炮制品及不同提取部位对小鼠的急性毒性比较初步探讨 魏颖婕supl;史辑sup2; 1大连市屮医医院药剂科（大连116013）； 2辽宁中医药大学药学院（沈阳110032） 国家自然基金青年基金，编号［摘 要］:冃的为探讨巴戟天有无毒性、其毒性部位以及炮制对巴戟天毒性的 影响，初步评价巴戟天的安全性，为其进一步药理研究提供参考，以期为巴戟天 炮制减毒増效机理研究提供依据。方法 参照经典的急性毒性（LD50、MTD、 MLD）试验方法 巴戟天主要的活性成分有蔥醍类、环烯醞菇类、多糖及低聚糖类以及有机酸类等 化合物。近年研究发现，何首乌有小毒，其主要化学成分为蔥醍类，而巴戟天中 亦含有大量的蔥醍类成分，但冃前巴戟天是否有毒，其毒性成分尚不清楚，且研 究较少。纵观历史，几乎所有的屮药都要经过炮制加工过程，其目的是增强药效、 降低或消除毒副作用，使其更适合临床用药要求。为探讨巴戟天有无毒性、其毒 性部位以及炮制对巴戟天毒性的影响，本实验对巴戟天不同炮制品及不同提取部 位进行小鼠急性毒性的比较研究，初步评价巴戟天的安全性，为其进一步药理研 究提供参考，以期为巴戟天炮制减毒增效机理研究提供依据。 1实验材料 1.1实验动物 清洁级昆明种小鼠，雌雄各半，体重（20plusmn;2）g,由辽宁长生生物 技术有限公司提供，合格证号SCXK （辽）2010-0001o于标准条件下饲养，适应环 境1周后开始实验。 1.2药物与试剂 巴戟天饮片：巴戟天生品、巴戟天木心、生拨巴戟肉、巴戟肉、盐巴戟 天、制巴戟天、水煮巴戟天按照2010年版《中国药典》所载制备方法以及本课 题组优化的工艺进行制备。（见表 表巴戟天生品与不同炮制品 品种 生品处理与炮制方法 巴戟天生品 取原药材，除去杂质及木心，洗净，晒干。 巴戟天木心 取净巴戟天药材，拨出木心，将木心剪成小段干燥。 生拨巴戟肉 取净巴戟天药材，拨出木心，切段干燥。 巴戟肉 取净巴戟天药材，置蒸器内蒸透，趁热除去木心，切段干燥。 盐巴戟天 取净巴戟天药材，用2%食盐水拌匀，闷润，待盐水被吸尽后蒸 透，趁热除去木心，切段干燥。 制巴戟天 取甘草煎汤，去渣，取净巴戟天药材，加药材量6%甘草汁同置 锅内文火煮至甘草汁被吸尽，趁热除去木心，切段干燥。 水煮巴戟天 取净巴戟天药材，加入与甘草汁等量的清水同置锅内文火煮至清 水被吸尽，趁热除去木心，切段干燥。 巴戟天醇提液：分别称取巴戟天生品、巴戟天木心、生拨巴戟肉、 巴戟肉、盐巴戟、制巴戟、水煮巴戟天，切成2-5mm左右的段，加入8倍量80% 的乙醇溶液，冋流提取3次，每次2h,过滤，弃去药渣，收集滤液减压浓缩至 无醇味，得浓缩液。浓缩液加适量蒸憾水成1.78 g/mL的巴戟天各炮制品提取液； 另取一份巴戟天生品同法制得浓缩液，巴戟天生品浓缩液加适量蒸惚水混悬，依 次用等体积乙酸乙酯、正丁醇各萃取三次，冋收溶剂，得乙酸乙酯萃取部位、正 丁醇萃取部位，各部位提取物分别加适量吐温?80和蒸憾水稀释至1.78 g/mLo 辅料甘草汁：将甘草饮片加12倍量水煎煮lh,过滤，药渣再加12倍量水重复 煎煮2次，3次所得煎煮液合并制成浓度为6.3 mg/mL的溶液。 巴戟天药材购自广西、甘草药材购自大连开发区阳光大药房，经辽宁中 医药大学鉴定教研室翟延君教授鉴定，巴戟天为茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How.的干燥根；甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥 根及根茎。加碘精制盐（大连盐业有限公司，批号o 水为娃哈哈纯净水，其他试剂均为分析纯。 1.3仪器 BS600-L电子分析天平（上海友声衡器有限公司）；腹腔注射器等。 2方法 2.1分组及给药 参照经典的急性毒性（LD50、MTD、MLD）试验方法[63],进行巴戟天 各炮制品及不同提取部位对小鼠急性毒性试验比较研究。经预试发现，各给药组 无法测岀半数致死量（LD50）和最大耐受量（MTD）,故进行1日内最大给药量 （MLD）试验。 将110只小鼠随机分为空白对照组和给药组（巴戟天生品组、巴戟天木心组、生 拨巴戟肉组、巴戟肉组、盐巴戟天组、制巴戟天组、水煮巴戟天组、辅料甘草汁 组、乙酸乙酯萃取组、正丁醇萃取组），每组10只（雌雄各5只）。实验前禁食不 禁水12h,给药组1次灌胃给药15 mL/kg, 3次/小 空白对照组给予等量的蒸憾 水，口组小鼠连续给药7 d。 2.2指标的测定 行为学观察：观察一般行为及饮食量和饮水量，隔日称1次体重。给药 期间记录小鼠的体重变化和死亡情况。各组小鼠于第8天取血后断髓处死，立即 解剖采集肝脏和肾脏组织，肉