光化学法联合凝血酶注射构建大鼠颅内静脉窦血栓形成模型的实验研究-神经外科学专业论文.docxVIP

硕士学位论文光化学法联合凝血酶注射构建大鼠颅内静 硕士学位论文 光化学法联合凝血酶注射构建大鼠颅内静 脉窦血栓形成模型的实验研究 硕士研究生陈成伟 导师汪求精副教授 摘要 研究背景： 颅内静脉窦血栓形成(Cerebral venous sinus thrombosis，CVST)是一组由 多种病因所导致罕见的脑静脉系统疾病，其临床症状复杂多变，且严重危害到 人类的生命。由于皮层静脉及静脉窦主干形成血栓，能够继发性引起脑水肿、 缺血性脑损伤、脑出血、颅内高压、昏迷、神经功能缺陷甚至死亡。成年人每 年发病率为钆5／10万人，儿童每年的发病率为7／100万人。并且，CVST的发 病率在逐年增高，约占脑血管意外疾病1％。其发病原因有口服避孕药、妊娠、 产褥期等，约75％的患者为成年女性。近年来，随着诊断技能、神经影像技术、 治疗技术的发展，超过80％的病人都得到了良好的预后。 近年来，CVST动物模型被用于血脑屏障破坏、脑水肿形成等病理生理变 化研究及药物治疗效果评估。然而，目前所建立的CVST动物模型的手段及病 理生理研究结果有较大的差异性，一个稳定的CVST动物模型需具备以下特性： l、能够模拟人类CVST的病理生理变化特点；2、CVST的阶段性变化与人类 保持一致；3、提供一个可供评估治疗效果的测试平台。然而，迄今为止仍然缺 少能够完全满足上述特点的动物模型方案。 目前国内的研究通过以下几种方式来构建CVST动物模型：1、上矢状窦单 纯结扎或阻塞法；2、结扎上矢状窦后注射促凝物质；3、单纯凝血酶注射4、 血管介入球囊阻塞下注射凝血酶；5、氯化铁(FeCl3)溶液湿敷。已有研究证 万方数据 摘要。实，血栓所累及的皮层静脉及桥静脉越多，其脑损伤程度越大。皮层静脉及桥 摘要 。实，血栓所累及的皮层静脉及桥静脉越多，其脑损伤程度越大。皮层静脉及桥 静脉堵塞后，血流无法通过侧支循环进行代偿，可引起静脉缺血性脑梗死。然 而，上述动物模型构建方法都无法在避免永久结扎静脉窦的情况下，使得静脉 窦及皮层静脉同时形成血栓。 光敏剂在脑血管循环时，在激发光照射下，可产生光化学反应，从而释放 氧自由基，氧自由基是一种有害的代谢物质，能够造成生物膜系统损伤及细胞 内氧化磷酸化障碍。一方面，氧自由基可与血管内皮细胞膜上的多不饱和脂肪 酸发生脂质过氧化反应。脂质过氧化物增加可破坏PGl2与TXB2的平衡，促进 血小板聚集粘附，激活凝血过程。另一方面，自由基也可损伤内皮细胞，使血 管壁的内皮细胞的细胞膜脱落，暴露出内皮下层的基底膜，内皮下层富含氨基 葡聚糖与胶原物质，能够促进血小板的粘附与聚集。内皮细胞受损后白细胞向 血管内皮细胞粘附，加重损伤，形成恶性循环，最终在血管中形成血栓。 光化学法的血栓形成过程与人类脑血栓形成发病机制、血栓形成过程、损 害程度较为相近，加之光照或光敏剂对血管本身不存在机械性损害，与临床上 的血栓性疾病的病理、生理上的发病机制极为相似。光化学法形成的血栓富含 红细胞、血小板及纤维蛋白，类似于临床上静脉红色血栓的病理结构。该方法 可造成血小板聚集及血管内皮细胞损伤，为抗血小板聚集药和抗血栓药物及预 防血栓药物的研究提供可能性，因而可广泛用于CVST等脑血管病的基础与临 床研究。 本课题旨在现有CVST动物模型的研究基础上，在通过光化学法联合凝血 酶注射的方式构建一个可用于基础、临床试验研究的大鼠上矢状窦．皮层静脉血 栓模型，从而提供一个有利于深入CVST疾病研究及治疗效果评估的平台。 颅内静脉窦血栓形成是一种罕见的、多病因的静脉缺血性脑卒中，发病率 仅占所有中风的0．5％，然而血栓形成于静脉的不同位置、皮层静脉及桥静脉的 受累与否使得临床症状出现多样性，缺乏特征性，早期的影像学特征不明显又 给诊断添加了不少难度，容易漏诊甚至误诊。近年来，随着诊断技术及治疗手 II 万方数据 硕士学位论文段的发展，CVST的诊断率提高，大多数患者能够得到早期治疗，预后良好， 硕士学位论文 段的发展，CVST的诊断率提高，大多数患者能够得到早期治疗，预后良好， 死亡率大大下降。然而CVST的发病机理及生理病理学研究尚未透彻，有待进 一步深入探索。CVST的病理生理改变是个复杂的过程，其动态改变在判断疾 病预后发展过程中显得尤为重要，目前国内外少有相关报道。 在本研究中，我们通过光化学法联合凝血酶注射形成稳定、可重复的CVST 动物模型并通过观察血脑屏障通透性、脑水肿、脑损伤和神经功能状态在较长 的时间内的动态改变，探索CVST不同发展阶段的病理生理学特点，为于临床 治疗提供理论基础并对疾病的发展作出预后判断。 第一部分光化学法联合凝血酶注射构建大鼠CVST模型 研究目的：构建一种新型CVST动物模型，检测血栓形成的位置及范围， 为评估模型稳定性、可重复性及