短枝条红型红富士苹果芽变的ISSR鉴定.pdfVIP

新疆农业科学2016，53(7)：1230—1236 Sciences XinjiangAgricultural doi：10．6048／j．issn．1001—4330．2016．07．008 短枝条红型红富士苹果芽变的ISSR鉴定 张俊苗，李文胜，曹倩，史进 (新疆农业大学林学与园艺学院，鸟鲁木齐830052) 摘要：【目的】利用ISSR分子标记技术对选择的富士芽变优系和12个苹果品种为材料进行分子鉴定，构建 指纹图谱。并且根据聚类分析的结果确定这13个苹果品种的亲缘关系。【方法】从100条ISSR引物中对供试 亲缘关系，并采用POPGENEl．32软件计算多态性位点数、多态性点百分率，最终筛选出条带清晰、多态性较 高、稳定且重复性好的引物。【结果】从100个ISSR引物中筛选出3个多态性高、重复性好的引物，分别为 86．1l％。利用3条多态性ISSR引物构建的数字化指纹能够有效地区分出所有供试材料，且建立了13个苹 果品种的亲缘关系聚类图，这13个品种的相似系数的变化范围在0．67～0．82，表现出较高的遗传多样性。 【结论]ISSR分子标记技术可以有效地用于苹果种质资源评价、指纹图谱的构建和苹果芽变品种的鉴定，为苹 果的种质资源鉴定、遗传多样性检测和栽培育种提供了分子生物学依据。 关键词：红富士苹果；芽变；ISSR鉴定 中图分类号：$661．1 文献标识码：A 文章编号：1001—4330(2016)07—1230—07 发挥着重要的作用№J。ISSR分子标记技术已成 O 引言 功用于梨‘7|、李…、核桃‘91、葡萄‘10]、枣‘11]、 【研究意义】DNA指纹图谱技术是通过直接杏‘12]、柑橘¨31和苹果[141等果树的品种鉴定、遗传 分析遗传物质的多态性来诊断生物内在基因排布 多样性或指纹图谱构建等研究报道。宣继萍 规律及其外在的表现规律…。由于直接以DNA 等[14、151以富士苹果为材料对ISSR反应体系中的 的形式表现，其差异体现的是不同的基因型差异， 主要影响因子的最佳反应条件进行了探索，建立 因而更加准确、客观，因此是目前应用最为广泛的 了适合于苹果的ISSR反应体系，并用两个引物将 指纹图谱技术心J。近年来，DNA分子标记技术的7个品种区分开来，初步证明利用ISSR分子标记 出现为在DNA分子水平上鉴定苹果品种提供了 技术能很好地将不同苹果品种鉴别出来；郭长奎 等¨引用一个引物就将17个苹果品种清楚地鉴别 强有力的工具¨J。【前人研究进展】ISSR(inter— repeats)标记是20世纪90年代中出，表现出ISSR分子标记在品种鉴定和亲缘关系 simplesequence 期发展起来的一种新型的分子标记技术MJ，具有 分析中的稳定性和可行性。【本研究切入点】短 多态性高、共显性、操作简便、稳定性好和重复性 枝条红型芽变的ISSR鉴定研究文献较少，利用以 高等特点”J，是一种可靠、快捷的分子标记技术， 优化好的ISSR反应体系，对12个苹果品种和芽 可用于大规模DNA指纹分析，在果树种质鉴定中 变优系构建ISSR指纹图谱，并进行亲缘关系分 收稿日期(Received)：2016一02一15 基金项目：国家林业公益性行业科研专项课题“新疆特色林果优良品种选育和推广”(201304701—1)；自治区特色林果发展专项林木遗 传育种项目(2014年) 作者简介：张俊苗(1989一)，女，江苏人，硕士研究生，研究方向为果树种质与资源，(E—mail)839141787@qq．corn 通讯作者(Corresponding qq．corn 万方数据 7期 张俊苗等：短枝条红型红富士苹果芽变的ISSR鉴定 1231 析，该芽变优系经观察鉴定表明其生物学性状和 电泳及拍照：