海姆泊芬光动力治疗bn大鼠脉络膜新生血管的实验研究-眼科学专业论文.docxVIP

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上海交通大学 上海交通大学 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意 学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许 论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等 复制手段保存和汇编本学位论文。 保密口,在一年解密后适用本授权书。 本学位论文属于 不保密d (请在以上方框内打“√”) 学位论文作者签名:彳%在蓄韧 指导教师签名:砂≮ 日期:冉矾年F月l 9日 Et期:d咿6年岁月I o IS 海交通人学医学院博J。学位论义海姆泊芬光动力治疗BN大鼠脉络膜新生血管的实验研究 海交通人学医学院博J。学位论义 海姆泊芬光动力治疗BN大鼠脉络膜新生血管的实验研究 摘要 脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是导致老年性 黄斑变性(age—related macular degeneration,AMD)、病理性近视、眼组织 胞浆菌病、血管样条纹等多种疾病视力严重下降的重要原因。现有的治 疗方法如常规激光光凝,经瞳孔温热疗法(transpupillary thermotherapy, TTT)、视网膜下CNV摘除、黄斑转位手术等,大多不具选择性而且容 易破坏正常视网膜结构和功能。近年来开展的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT),因为光敏剂选择性聚集于CNV部位以及对病变部位采 用特定波长的激光照射的双重选择性能够特异性地作用于CNV,而几乎 不损伤周围正常组织,正成为一种新的、安全有效的治疗方法。 目前国内外眼科临床PDT所用的光敏剂Visudyne,是美国FDA批 准的唯一用于眼科临床的光敏剂,该药价格昂贵,对患者和社会造成了 巨大的经济负担。海姆泊芬是近年来国内研制的一种新型光敏剂,具有 结构明确、成分单一、光敏作用强、体内分布和消除迅速、毒副反应小 等特点。临床上已广泛应用于皮肤鲜红斑痣的治疗,眼科方面已有关于 海姆泊芬PDT有效封闭角膜新生血管以及对正常视网膜生物学效应的实 验性研究。本研究通过观察海姆泊芬PDT对BN大鼠CNV以及人脐静 海交通人学医学院博I。学位论文脉内皮细胞HUVEC的作用,评价海姆泊芬PDT治疗BN大鼠CNV的 海交通人学医学院博I。学位论文 脉内皮细胞HUVEC的作用,评价海姆泊芬PDT治疗BN大鼠CNV的 可行性和有效性,并初步阐明其作用机制,为海姆泊芬PDT的临床应用 提供实验依据和理论基础。 第一部分半导体激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管形成 目的观察不同能量的810 nm半导体激光光凝对棕色挪威(Brown Norway,BN)大鼠CNv形成的影响,探讨诱导cNV模型的合适激光参数。 方法健康BN大N49R,随机取7只作为对照,其余42只等分为3组。采 用功率分别为120 mW、140 mW和160 mw,光斑直径75 gm,曝光时间 100 ms的810 nm半导体激光光凝大鼠双眼视网膜,光凝后1、3、7、14、 21、28及56天行眼底、眼底荧光血管造影(fundus fluorescein angiography, FFA)/吲哚菁绿血管造影(indocyaninegreen angiography,ICGA)、光 学显微镜、CD3。免疫组织化学以及透射电子显微镜检查。结果120 mw、 140 mW矛lJ 160 mW=组光凝后7天出现CNV;21天CNV达到高峰,此时以 FFA币NICGA检查证实的CNv成模率分别为45.54%、88.18%、85.45%及 45.54%、89.09%、91.82%:28天CNV仍处于高峰状态,56天CNV有所减 少。结论8 1 0 nm半导体激光可成功诱导BN大鼠cNV模型,成模率高, 成模高峰位于激光后21天。造模的理想参数为:功率140 mw,光斑直径 75 gm,曝光时间100 ms。 海交通人学医学院博I.学位论义 海交通人学医学院博I.学位论义 第二部分海姆泊芬在BN大鼠眼底组织分布的研究 目的观察海姆泊芬静脉注射后不同时间在BN大鼠CNV眼底组织的浓度 分布变化和差异,探讨PDT激光照射的合适时机。方法双眼CNv成模BN 大鼠20只,随机取4只作眼底血管造影,尾静脉注射10 mg/kg海姆泊芬 后,采用SLOq_j/视网膜、脉络膜血管及CNV连续、动态观察;其余16 只大鼠随机等分为8组,其中1组为空白对照组,其余7组在10 mg/kg海姆 泊芬静脉给药后于3、5、1 5、30、60、120分钟和24小时分别处死,制作 石蜡切片,荧光显微镜下观察不同组织的荧光强度。结果眼底血管造影 和荧光显微镜检查均显示:在静脉注射

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