储粮真菌危害早期检测方法的研究.pdfVIP

2011年4月 中国粮油学报 V01．26，No．4 oftheChineseCerealsandOilsAssociation 第26卷第4期 Journal Apr．2011 储粮真菌危害早期检测方法的研究 程树峰 唐 芳 伍松陵 (国家粮食局科学研究院，100037) 摘要在传统真菌孢子计数法的基础上，为消除样品自身携带真菌孢子的干扰，通过对样品检测浓度 设限，建立了一个储粮真菌危害早期检测方法——危害真菌孢子计数法。方法操作为样品用水提取，过滤，滤 液于显微镜下进行真茵孢子计数。在本试验中对样品前处理条件进行了优化，最佳样品提取条件，称样量为 10g，提取时间为1 标准偏差(RSD％)范围在8．2％～31．4％；与平板茵落计数法比较，相关系数r2=0．8479，显示出两者具有良 好的相关性。本方法可用于储粮真菌危害的早期检测。 关键词储粮真菌危害 早期检测 危害真茵孢子计数 中图分类号：$512文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2011)04—0085—04 在储粮过程中真菌的危害是造成粮食损失的一 取10．0g粮食样品，于50mL试管中，加入30 个主要原因。预防储粮真菌危害最为有效的方法， mL去离子水，加塞，剧烈振荡1min，用300目滤布过 就是早发现、早处理，将危害控制在萌芽状态。因 滤，滤液于显微镜下进行危害真菌孢子计数。 此，储粮真菌危害的早期检测是解决这个问题的关 1．3．2平板菌落计数法 键，但目前这项技术仍是制约全球各国安全储粮的 操作与GB 一个瓶颈。近几十年来，国内外相关研究有很多报 查氏培养基。 道，利用真菌某些特定的化学成分或代谢物质检测， 1．3．3水分测定方法 进行储粮真菌危害的预报，是用的最多的一种方法， 采用电阻式水分测定法。 如细胞壁多糖¨]、麦角甾醇旧。】、真菌酶类H1及一些 真菌挥发性物质。9’等的检测。但这些成果多数仍 2 结果与分析 处于研究阶段，实际应用较少。本试验对储粮真菌 2．1前处理条件优化 危害早期检测方法进行了研究，并建立了一个储粮 2．1．1称样量 真菌危害快速的早期检测方法，为我国储粮真菌危 分别称取10、14、18g被感染的小麦样品，按照 害早期的检测提供技术支持。 1．3．1方法，进行样品的前处理和显微镜下危害真 菌孢子计数，每个样品3次重复，取平均值，结果见 1 材料与方法 图l。如图1所示，不同的称样量对样品危害真菌 1．1粮食样品 孢子计数的结果无明显影响，本试验中称样量定为 小麦和稻谷样品，由中储粮某直属库提供。 10 g。 1．2试剂和仪器 NIKON E100显微镜：日本尼康公司；722一可见 光分光光度计：山东高密分析仪器厂；QLY—T型钳 o 式粮食水分快速测定仪：山东青州市巨丰粮油仪器 七 n 宝 厂：HPS一250生化培养箱：哈尔滨东联电子技术开 、