微生物课件第3章.pptVIP

吸附 侵入 裂解 增殖 成熟 噬菌体的繁殖-复制 1) 吸附 Adsorption 随机碰撞而接触（静电引力或氢键） 可逆吸附，无特异性（非细胞颗粒也可吸附） 病毒表面蛋白与细胞受体的结合 特异性，不可逆吸附，启动病毒感染的第一阶段 不同种系的细胞具有不同病毒的细胞受体，病毒受体的细胞种系特异性决定了病毒的宿主范围。 分别吸附于大肠杆菌性毛和菌体上的噬菌体 2) 侵入Penetration 有尾噬菌体： 注射方式将噬菌体核酸注入细胞 通过尾部刺突固着于细胞； 尾部的酶水解细胞壁的肽聚糖，使细胞壁产生小孔； 尾鞘收缩，核酸通过中空的尾管压入胞内，蛋白质外壳留在胞外； 吸附 尾钉固着 尾鞘收缩 尾管穿入 DNA注入 脱壳： 病毒侵入后，病毒的包膜和/或壳体除去而释放出病毒核酸的过程 脱壳是病毒基因组进行功能表达所必需的感染事件。 T-偶数噬菌体脱壳与侵入是一起发生的 病毒的毒粒消失，失去原有的感染性，进入潜隐期。 （3）增殖Duplication 病毒利用宿主的生物合成机构和场所，使病毒核酸表达和复制，产生大量的病毒蛋白质和核酸。 4) 病毒的装配与释放Assembly and release 新合成的毒粒结构组分组装成完整的病毒颗粒，称做病毒的装配， 亦称成熟（maturation）或形态发生（morphogenesis）。 T4噬菌体的装配是一个极 为复杂的自我装配的过程 大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放 成熟的子代病毒颗粒然后依一定途径释放到细胞外 丝杆噬菌体（如M13或fd）不杀死细胞，子代毒粒以分泌方式 不断从受染细胞中释放，并同时完成毒粒的组装。 自外裂解（lysis from without） 如果大量噬菌体在短时间内吸附于同一细胞上，使细胞壁产生许多 小孔，也可引起细胞立即裂解，但并未进行噬菌体的增殖，这种现 象称为自外裂解（lysis from without）。 病毒的复制周期（或复制循环） 自病毒吸附于细胞开始，到子代病毒从感染细胞释放到细胞 外的病毒复制过程。吸附、 侵入、 增殖（复制与生物合成）、成熟（装配）、 裂解（释放）； 2、噬菌体效价的测定 效价（titer)——每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌 体粒子数，又称噬菌斑形成单位（pfu）或感染中心数 测定方法——双层平板法（two layer plating method) 用双层平板法测出的效价比用电镜直接记数得到的效价低。 前者是计有感染力的噬菌体粒子，后者是计噬菌体的总数。 3、一步生长曲线（one step growth curve） 1939年，Max Delbruck Emory Ellis： E. coli / bacteriopage 定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线 以适量的病毒接种于标准培养的高浓度的敏感细胞，待病毒吸附后，离心除去未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清处理病毒—细胞培养物以建立同步感染，然后继续培养并定时取样测定培养物中的病毒效价，并以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线。 3、一步生长曲线 （one step growth curve） 1、潜伏期 latent period ； 从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期（分隐晦期和胞内累积期） 2、裂解期rise period ； 随着菌体不断破裂，新噬菌体数目急剧增多的一段时间 3、平稳期plateau ； 感染后的宿主细胞已全部裂解，溶液中的噬菌体效价达到最高点的时期 不同病毒的潜伏期长短不同，噬菌体以分钟计，动物病毒和 植物病毒以小时或天计。 噬菌体的裂解量一般为几十到上百个，植物病毒和动物病毒可达 数百乃至上万个。 裂解量：每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。 其值等于潜伏期受染细胞的数目除以稳定期受染细胞所释放的全部子代病毒数目，即等于稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比。 4、溶源性 (lysogeny) 烈性噬菌体（virulent phage）： 感染宿主细胞后能在细胞内正常复制并最终杀死细胞， 形成裂解循环（lytic cycle）。 温和噬菌体（temperate phage）或溶源性噬菌体（lysogenic phage） 感染宿主细胞后不能完成复制循环，噬菌体基因组整合到宿主细胞的基因组上，并随后者的复制而进行同步复制，没有成熟噬菌体产生。这一现象称做溶源性（lysogeny）现象 温和噬菌体的溶源性反应： 整合于细菌染色体或以质粒形成存在的温和噬菌体 基因组称做原噬菌体（prophage） 在原噬菌体阶段，噬菌体的复制被抑制，宿主细胞 正常地生长繁殖，而噬菌体基因组与宿主细菌染色 体同步复制，并随细胞分裂而传递给子代细胞。 细胞中含有以原噬菌体状态存在的温和噬菌体基因组