基质金属蛋白酶_.docVIP

.. .. 基质金属蛋白酶 _ 基质金属蛋白酶 细胞外基质和基底膜重塑是癌细胞侵袭转移过程中的关键环节，需借助于 蛋白降 解酶的表达和激活。基质蛋白酶主要有以下数种：丝氨酸蛋白酶类，包 括血浆酶 原激活剂；半胱氨酸蛋白酶类，包括组织蛋白酶 0 在内的溶酶体酶； 金属蛋白酶 类 0^1110^^0^611^565) [1] 。金属蛋白酶类在肿瘤侵袭过程中的 作用近年 来倍受关注，大量证据表明基质金属蛋白酶，特别是基质金属蛋白酶 - 2 (matrix metalloproteinase-2, MMP-2) 在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解中 起关键作 用，临床研究表明，順 ?_2 活性和表达的增加与人类多种恶性肿瘤侵 袭转移潜能 及预后密切相关 [2? 4]。 一.嫩识-2 基因及其表达和激活的调节 MMP-2 基因位于人类染色体 16q21, 由13 个外显子和 12 个内含子所组成， 结构 基因总长度为 27 此，与其他金属蛋白酶不同， _-2 基因 5旁侧序列促 进子区域含 有 2 个 60 盒而不是 1414 盒[5]。_-2 以前酶原的形式由多种细 胞分泌，如成纤维 细胞、巨噬细胞、内皮细胞和恶性肿瘤细胞等。与其他金属 蛋白酶相似，嫩 1?-2 分子含有氨基末端片段、金属结合片段及竣基末端片段， 其中带有高度保守序列 PRCGV/NPD 的氨基末端具有一个不配对的半胱氨酸残基， 该残基与激活位点的 锌原子相互作用介导着— _2 的前体状态；金属结合片段 是公认的锌结合部位，其 含旁侧有 2 个组氨酸的保守序列册 4 出羧基末端具 有类似凝血酶的片段，该片段 的具体功能尚未明确。此外， _-2 还具有一个 58 个氨基酸残基组成的明胶结合片 段，此片段与纤维连接素的明胶结合 11 型基 元相似[6] 。目前认为， _-2 表达和功 能的调节发生于转录、分泌、前酶原 的激活、细胞表面的结合以及与来源于肿瘤或宿主细胞的 MMP 抑制剂的相互作 用等多个不同的水平。 MMP-2 的转录调节与其他金属蛋白酶相比具有一定的独特性，如佛波醇酯 (phorbol 6316 ：^ 通过仙-1 位点的介导增加腿 ?-9 和间质胶原酶的表达，而 題?-2 基因促进子区域未能测得 4?-1 位点[5] ；转化生长因子 -p l(TGF-p 1) 通过其抑制元素 11 ￡抑制间质胶原酶的表达[7], 而 10?-0 1 却能诱导人类细 胞株转录出高水平的丽 ?_2 信使核糖核酸 (—4) [8] 。此外，整合素受体和 丁則 161^5( ：化)亦能诱导 MMP-2 的转录表达。 MMP_2 在细胞外以前酶原的状 态存 在，体外实验表明有机汞化合物和蛋白酶等均可通过干扰氨基末端不配对半 胱 氨酸残基与激活位点的锌原子间的相互作用，导致前酶原氨基末端 80 个氨基酸 片段的自身催化降解转化成酶原，获得胶原溶解的活性，激活的酶原进行自身 蛋 白降解，最终产生具有稳定活性 62^) 酶，这种激活过程被称为“半胱氨酸开 ^?(cysteine switch) ，，[9假] 。说 由于膜型 MMP 即MTl-MMP 的成功克隆和排序， MMP_2 在体内激活的受体机 制已被基本阐明。将町 1-剛？质粒转染入 0^-1 细胞株内后， .^!!^*!{^ 即表达 于 该细胞株的胞膜，并导致 __2酶原的特异性激活 [10] 。研究发现， MMP_2 酶原的 激活依赖丁‘由 11 邮-2(1^85 收 inhibitor of ^6 七110 口1^^61 服 56-2) 与 MTl-MMP 结合始动的一个三元复合体的形式，虽然高浓度的 TIMP-2 抑制 MMP_2 的活性[11] 。 MMPS 活性调节的关键是 TIMPS 对其酶活性的抑制作用。研究表明 MMP_2 及 其前体均可与 11 肥-2 结合，但结合位点并不相同。 _-2 前体-11 即-2 复合体 在 不裂解的情况卜仍可被继续激活产生 MMP_2 活性，该活性能被额外的 TIMP-2 完全抑制 [12] 。所以丽?-2 与 1^?5 -2 的相对浓度最终决定麗 ?-2 胶原降解的 能 力。關?-2 的主要底物为吖型胶原，其次还有乂、 VD、K、乂型胶原及纤维 连接 素和弹性蛋白等。 二.嫩 11)-2 与恶性肿瘤的侵袭转移 体外实验结果显示， ras 基因诱导的恶性肿瘤细胞株的 MMP-2 表达增加， 激活 MMP-2 的单克隆抗体能促进 A2058 细胞株的侵袭能力，而抑制 MMP_2 的单 抗 则使 42058 细胞株穿透重组基底膜的能力明显减弱 [13] 。打服-2 对肿瘤侵 袭转移 的抑制是 NMP_2 与肿瘤侵袭转移相关性的又一佐证。 TIMP-2 过度表达， 能抑制 转移性 ras