课件：非典型肺炎实验室培训.ppt

结 论 1、形态学、分子生物学、细胞培养及血清学证据表明我们已分离培养到一种新的冠状病毒，这种冠状病毒可能是引起SARS的另一个重要病原。在数个病人肺、脾标本中证实存在冠状病毒，在确定病因上比从咽拭子及其培养物中检出冠状病毒更具说服力。 2、发现在病人尸解标本中同时存在衣原体样颗粒和冠状病毒，是世界上SARS病原学研究的重要进展，对最终阐明和确定引起SARS的病原具有特别重要的意义 国际研究进展 国际间对非典型肺炎病因的认识 禽流感（Avian influenza virus） 衣原体（ Chlamydia-like agent） 副粘病毒(Human Metapneumonia Virus ) 冠状病毒(Coronavirus) 国际间SARS病因学研究进展（1） 2003年3月15日WHO组织国际间的研究网络，相继有11个国家的科学家参加，我国于4月初参加； 3月18日德国科学家通过电镜从咽拭子标本观察到副粘病毒，同时香港中文大学获得Metapneumo 病毒的基因扩增产物，电镜图片和基因序列均在网络公布； 3月19日新加坡从病人呼吸道标本发现副粘病毒颗粒并获得较微弱的病毒基因扩增产物（香港中文大学引物）。国际上首先发现Metapneumo 病毒的荷兰鹿特丹实验室获得有关病人的标本。 资料可以编辑修改使用 资料来源网络，如有侵权联系删除，不负法律责任谢谢 感谢您的观看和下载 资料仅供参考，实际情况实际分析 国际间SARS病因学研究进展（2） 3月20日国际上有4个实验室开始进行Metapneumo 病毒检测，香港中文大学在电镜下发现副粘病毒颗粒；荷兰 鹿特丹实验室检测到副粘病毒，但是Metapneumo 病毒 扩增为阴性；该实验室将检测试剂送到新加坡和香港，加拿大实验室将双份血清送到鹿特丹。 3月21日香港中文大学科学家用猴肾细胞培养方法获得病毒分离物，随即研制了相应的血清学诊断试剂； 国际间SARS病因学研究进展（3） 同时许多实验室的研究结果显示此次病原体与下列病原体无关，甲、乙型流感病毒，呼吸道合胞病毒，副流感病毒1，2，3型，腺病毒，鼻病毒，肠道病毒，人Meta病毒，肺炎支原体，肺炎衣原体。同时证明加入病人血清可以抑制细胞病变而对照血清无效。电镜观察到病毒颗粒为50-60nm。同一天鹿特丹实验室发现德国3个新加坡病人呼吸道标本的HMPV病毒PCR检测为阴性。并且在两个可疑病例的呼吸道标本接种Vero细胞和猴肾细胞发现病变。同时英国科学家检测该两病人标本中的H3N2流感病毒。 国际间SARS病因学研究进展（4） 3月22日香港政府病毒实验室电镜发现冠状病毒样颗粒（70nm)，美国从泰国病人标本得到的细胞病变产物中发现冠状病毒样颗粒（70-100nm），在同一份标本获得HMPV病毒PCR阳性结果。与此同时加拿大，法国，新加坡等地开始使用PCR和电镜方法检测副粘病毒和HMPV病毒。加拿大发现20nm 的病毒颗粒并且发布HMPV病毒的基因进化树。 3月23日香港政府病毒实验室在8份标本中发现2份冠状病毒RNA阳性；美国报道在香港标本中发现冠状病毒，同时建立免疫荧光检测病人血清的方法并将冠状病毒的基因扩增引物在网络公布。在新加坡和香港开始用鼻咽拭子支气管感染的方式进行非人类灵长类动物实验。加拿大和法国分别在电镜和PCR方法发现冠状病毒。德国，日本，新加坡在Vero细胞分离到病毒。英国实验室在可疑病例呼吸道和尿标本检测到鸡肺炎病毒（Avian pneumovirus(4))序列。 国际间SARS病因学研究进展（5） 3月24-26日更多的实验室（德国，香港）通过电镜和PCR 方法检测到冠状病毒，德国实验室获得病毒序列，在蛋白质水平与已知冠状病毒的多聚酶基因相符，更多的基因扩增产物及其序列在不同国家获得，德国，荷兰，香港，并在网络公布基因进化树。 3月27-31日继续进行猴子实验，香港和美国实验室分别证实正常人血清与新分离病毒为阴性反应。但是有更多的实验室检测到冠状病毒。日本从新加坡标本中获得阳性结果。香港检测50份病人血清，其中27份与冠状病毒抗体升高， 同时他们还从10个病人粪便中发现5份为病毒检测阳性，并且发现6-16天病人粪便中可以检测到病毒基因。加拿大在病人标本中发现人类Meta 病毒。 国际间SARS病因学研究进展（6） 4月1-8日用副粘病毒和Meta病毒共同感染猴子，出现临床症状。 美国用ELISA方法从发病20天病人血中检测到抗体。香港免疫荧光方法从发病10天的病人血清中检测到IgM抗体。小白鼠实验开始启动。更多实验室在Vero 细胞分离到冠状病毒。又有一些血清学实验证实此次病因为副粘病毒和冠状病毒的复合感染，冠状病毒的新序列继续在荷兰、德国、香港和美国发现。德国科学家在标本中发现衣原体