灰树花子实体多糖降血糖作用及机理研究-食品科学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 A Dissertation Submitted for the Degree of Master The blood-glucose lowering effect of polysaccharide purified from Maitake and its mechanism of action By Wang Qin Hefei University of Technology Hefei, Anhui, P.R.China April, 2014 万方数据 万方数据 致 谢 本课题是在雷红副教授的悉心指导下完成的，从开题到定稿都浸透着导师的 心血和汗水。在科研学术方面，雷红导师认真严谨的治学态度、见微知著的创新 思维对我的影响很大，使我对待科研的态度由一开始的马马虎虎、按部就班转变 为勤奋认真，敢于尝试和创新；在做人做事方面，她更是我学习的榜样，严于律 己、宽以待人、为人师表、以身作则，她的人格魅力深深感染了我，在如何为人 处世方面给了我很大启发，使我在这短短三年的研究生阶段里成长了许多，所以 在这里由衷感谢雷红导师对我的严格要求和悉心培养，也谢谢她这三年里对我的 包容和帮助。 在此，我还要感谢实验室的郭淑臻，张敏敏，祝娟娟，李晓乐，魏巧年等同 学，他们是我学习中的良师和生活上的益友，无数次给予我无私的帮助和关心。 感谢合肥工业大学研究生院和生物与食品工程学院在生活和学习中给予我的 帮助与关怀。 还要特别感谢我的父母，他们多年来的支持和鼓励是我不断向前进步的动力， 因为他们，我才成为今天的我。 最后，向所有关心、支持和帮助过我的老师、同学和朋友们表示诚挚的谢意。 作者：王 琴 2014 年 3 月 30 日 I 摘 要 本论文研究灰树花子实体多糖的降血糖活性，并从细胞及分子水平深入研究 其作用机制。通过 8 周高脂饮食和链脲佐菌素（STZ）注射建立 2 型糖尿病小鼠 模型，研究灰树花子实体多糖对 2 型糖尿病小鼠模型的治疗作用；另外，从缓解 胰岛素抵抗和胰岛细胞保护两个方面进行降血糖作用机理的研究。主要研究内容 及结果如下： 1、灰树花子实体多糖对实验性 2 型糖尿病小鼠模型的治疗作用。取昆明种小 鼠随机分成正常对照组、模型对照组、灰树花多糖低剂量（150mg/kg）组、灰树 花多糖高剂量（450mg/kg）组。正常对照组用普通饲料喂养；模型对照组、灰树 花多糖给药组小鼠用高脂饲料喂养，连续喂养 8 周，并于第 4 周末注射 STZ。每 周检测小鼠的空腹血糖和体重，每天记录小鼠的摄食量和饮水量。结果显示模型 对照组相比空白对照组小鼠的血糖和饮水量明显升高，表明 2 型糖尿病小鼠模型 成功建立。实验第五周末，给药组小鼠开始每天灌胃给予灰树花子实体多糖 450mg/kg、150mg/kg，连续给药 3 周。检测各组小鼠葡萄糖耐量、糖化血清蛋白、 肝糖原、血脂、血清胰岛素水平等指标，胰腺组织形态显微观察。结果显示，模 型对照组与给药组小鼠的体重和摄食量没有显著差别，表明灰树花子实体多糖对 小鼠的体重和摄食量没有显著的影响；灰树花多糖给药组相比模型对照组小鼠饮 水量、空腹血糖、糖化血清蛋白、血脂水平明显下降，肝糖原含量明显升高，表 明灰树花多糖具有缓解糖尿病症状的作用；灰树花多糖给药组小鼠灌葡萄糖 45min、90min 后，体内血糖含量明显低于模型对照组，表明灰树花多糖可提高小 鼠葡萄糖耐量的能力；病理组织学观察显示灰树花多糖给药可使胰腺组织的破坏 程度明显改善，具有胰腺细胞保护作用。 2、研究灰树花子实体多糖缓解胰岛素抵抗的分子机理。检测灰树花子实体多 糖对胰岛素抵抗相关基因表达的影响。胰岛素抵抗相关基因为胰岛素受体（insulin receptor，InsR）、胰岛素受体底物（insulin receptor substrate，IRS）、磷脂酰肌醇 3 激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）、葡萄糖转运体-4（glucose transporter 4，GluT-4）基因。实验结果显示，给药组的胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底 物（IRS-1、IRS-2）、磷脂酰肌醇 3 激酶（PI3K）、葡萄糖转运体-4（GluT-4）的 基因表达量明显高于模型组，显示灰树花多糖具有上调胰岛素受体相关基因的表 达，从而达到提高胰岛素受体敏感性、缓解胰岛素抵抗、治疗 2-型糖尿病的作用。 3、研究灰树花子实体多糖对胰岛细胞保护的机制途径。首先，研究灰树花多 糖对细胞凋亡相关基因影响的作用机理，胰岛细胞凋亡相关基因为蛋白激酶 B （protein kinase B，PKB，亦称 Akt）、B 淋巴细胞瘤-2 基因（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）、Bcl-