临床常见病原体检查2课件.pptVIP

第二节：病原体耐药性检测 抗菌药物是目前临床使用最为广泛的药物，它的发现、研制和临床应用是现代医学史上的重要里程碑，使绝大多数微生物感染，尤其是细菌感染成为可治性疾病 抗生素压力 耐药菌株极少 x x 耐药菌株为主 抗生素暴露 x x x x x x x x x x 体外抗菌药物敏感试验的方法 常用的检查细菌是否对药物耐药的方法有定性测定的纸片扩散法、定量测定的稀释法和E试验法。对某些特定耐药菌株的检测除药物敏感试验外还要附加特殊的酶检测试验、基因检测等方法。常用方法有: 纸片扩散法（Kirby-Bauer test） 稀释法（dilution test） E试验法（E test） 耐药筛选试验 折点敏感试验 药敏试验结果的解释（1） 敏感（susceptible）：表示测试菌能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭。 耐药（resistant）：表示测试菌不能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭，治疗无效。 药敏试验结果的解释（2） 中介 (intermediate) : 测试菌能被测定药物大剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制，或在测定药物浓集部位的体液(如尿)中被抑制 该范围作为敏感与耐药之间的缓冲区，避免由于微小技术误差影响实验结果。 （二）特殊的耐药菌监测的特殊试验 由于细菌存在一种或几种耐药机制，造成了细菌的多重耐药性。单一的药敏试验已不能完全表示细菌的耐药性，必须进行一些特殊的耐药性监测试验。 1.耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的筛选测定 2.氨基糖苷类抗生素高耐药肠球菌的筛选测定 3.耐万古霉素肠球菌（VRE）的筛选测定 4.耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）的筛选测定 5.β-内酰胺酶的检测 6.超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的检测 1.耐甲氧西林葡萄球菌的筛选测定（methecillin resistance staphylococcus，MRS） 包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 是目前导致医院感染的重要病原菌。 此类葡萄球菌具有多重耐药性，即对全部β一内酰胺类抗菌药物，包括青霉素族和头孢菌素族以及临床常用的其他多种抗菌药物均耐药。因此，此类葡萄球菌的早期检出和确定具有重要临床意义 1.耐甲氧西林葡萄球菌的筛选测定（methecillin resistance staphylococcus，MRS） 1μg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤10mm，或MIC≥4μg/ml的金黄色葡萄球菌, 1μg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤17mm，或MIC≥0.5μg/ml的凝固酶阴性葡萄球菌称耐甲氧西林葡萄球菌。 临床意义 对所有β-内酰胺类药物均无效，并对氨基糖甙类、大环内脂类、克林霉素和四环素等抗生素多重耐药。 治疗首选药物为万古霉素。 2.超广谱β-内酰胺酶(extend spectum β-lactamase, ESBL)的检测 超广谱β-内酰胺酶是由质粒介导的基因所编码，可水解青霉素类、头孢菌素和氨曲南，主要见于大肠埃希菌、肺炎克雷伯克、产酸雷伯菌及奇异变形杆菌。 筛选方法：双纸片扩散法、三相试验和E试验 双纸片协同试验操作简便、结果可靠、成本不高，是临床上较常开展的项目。 临床意义 产ESBL细菌，不论体外药物敏感试验结果如何， 对青霉素类、1-3代头孢菌素类和氨曲南治疗均无效，药敏也全部修改成耐药。 提 纲 (Outline) Section 1：标本的采集运送、实验室评价和检查方法 Section 2：病原体耐药性检测 Section 3：临床感染常见病原体检测 Section 4：病毒性肝炎检测 Section 5：性传播疾病病原体检测 Section 6：医院感染常见病原体检测 （一）细菌感染检查项目的选择 细菌感染性疾病一般均需进行细菌学诊断以明确病因。 三个方面着手：①检测细菌或其抗原-主要包括直接涂片显微镜检查、培养、抗原检测与分析。②检测抗体。③检测细菌遗传物质-主要包括基因探针技术和PCR技术。 难培养或培养要求高的细菌：综合运用免疫学或分子生物学检测，如结核分枝杆菌感染以及幽门螺杆菌感染等。 细菌培养是最重要的确诊方法。 （二）病毒感染检查项目的选择 在易感细胞内以复制方式进行增殖的非细胞型微生物 病毒感染的实验室检查包括病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原的直接检出，以及特异性抗体的检测。 病毒分离与鉴定：细胞培养。 早期诊断手段：多检测病毒抗原、特异性抗体或核酸。 （三）真菌感染检查项目的选择与应用评价 真菌是以腐生或寄生方式摄取养料的真核细胞型微生物。 真菌的微生物学诊断手段主要包括直接检查、培养检查、免疫学试验和动物试验 直接显微镜检查：初步明确真菌感染 分离培养：