抗氧化治疗阻止非酒精性脂肪性肝炎进展的机制-内科学专业毕业论文.docxVIP

河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 承担相应的法律责任。 ；，0_．‘：l A霹≥奄． ～签名稍一雹一弼 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 碱妇碍荫刷醛轹专簪日 中文摘要氧化应激在非酒精性脂肪肝中的作用分子机制 中文摘要 氧化应激在非酒精性脂肪肝中的作用分子机制 的研究 摘 要 目的：非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic stea- tohepatitis，NASH)是由于肝内脂质沉积而引起的肝细胞坏 死、炎症和纤维化等肝损伤，是非酒精性脂肪性肝病 (nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)由单纯性肝脂肪变 向肝硬化甚至肝癌进展的重要阶段，NASH导致的肝硬化具 有与乙、丙型肝炎肝硬化相同的不良预后。国内外学者对其 日益关注，研究不断深入，但其病因及发病机制仍不十分清 楚，在防治上亦缺乏有效手段。目前认为氧化应激(oxidative stress)是NASH发病的重要因素之一，改善氧化应激可能有 助于防止本病的进展。1一氨基苯丙三唑(1．amino． benzotriazole，ABT)及维生素E作为抗氧化剂，能明显减轻组 织对氧化应激的敏感性。ABT属于细胞色素P450(cytochro． me P450，cYP)拮抗剂，人体内CYP是位于滑面内质网上的一 组混合功能氧化酶系，是肝脏代谢最主要的酶系之一，它主 要定位于肝微粒体，CYP在NASH发病中的作用及其机制目 前尚未明确。维生素E(vitamin E，Vit E)是一种脂溶性维生 素，它能清除自由基，阻断脂质过氧化过程中的链式反应， 从而保护细胞免受损害。本研究采用高脂、胆碱．蛋氨酸缺乏 (hi曲fat，methionine and choline deficient diet，MCD)饮食 建立小鼠NASH模型，应用CYP抑制剂ABT干预治疗，以逆 转录．聚合酶链反应(reverse transcription．polymerase chain 中文摘要reaction，RT．PCR)方法和Western 中文摘要 reaction，RT．PCR)方法和Western blot法研究细胞色素C (Cytochrome C，Cyt C)、Bax在NASH小鼠肝组织中的表达 情况及其与病情进展的关系，以探讨CYP被ABT抑制及阻断 脂质过氧化过程中的链式反应后，氧化应激在NASH发病中 的作用及其机制，是否可抑$OCyt C及Bax的表达，延缓或阻止 NASH的进展，以进一步揭示改善氧化应激在NASH中的作 用，为有效防治本病提供新的思路。 方法：选用健康雄性C57BL6／J小鼠25只，随机分为5 组，每组5只。模型组采用MCD饲料，对照组给予胆碱、 蛋氨酸充足的饲料，ABT干预组以MCD饲料加ABT腹腔 注射(50mg／kg／d)，维生素E干预组以MCD饲料加喂养维 生素E(100mg／kg饲料)，ABT+维生素E干预组以MCD 饲料加喂养维生素E(100mg／kg饲料)+ABT腹腔注射 (50mg／kg／d)，喂养3周。血清甘油三酯(triglyceride，TG)， 丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase，ALT)，天门冬 氨酸氨基转移酶(Aspartate amino-transferase，AST)采用日 本Olympus AU 2700全自动生化分析仪测定；肝组织病理学 变化采用苏木精。伊红(hematoxylin．eosin，HE)，苏丹Ⅳ (Sudan IV)染色观察；肝组织Cyt C mRNA及Bax mRNA 和蛋白表达分别采用RT．PCR和Western blot检测。 结果： 1动物一般情况：对照组小鼠活泼、毛发有光泽，体重 逐渐增加。模型组和ABT干预组、维生素E干预组、ABT+ 维生素E干预组小鼠体重均下降，尤以模型组明显。对照组 小鼠体重、肝湿重均较模型组和干预组增加显著 (16．96+1．389、27．234-1．109、17．844-0．869、17．274-0．929、 中文摘要17．824-0．869，0．70-a：0．159、1．12--t：0．169、0．74+0．1 中文摘要 17．824-0．869，0．70-a：0．159、1．12--t：0．169、0．74+0．1 lg、0．76+0．179、 0．78土0．1 99，P0．05)，模型组体重、肝重与ABT干预组、 维生素E干预组、ABT+