美洲大蠊（Periplaneta americana L.）抗菌肽的研究-森林保护学专业毕业论文.docx

福建农林大学博士论文组分对大肠杆菌(Escherichia 福建农林大学博士论文 组分对大肠杆菌(Escherichia coli)Kss、K99、IB、2B、3B、金黄葡萄球菌 (Staphyloccus clureus)、沙门氏菌(Serratia marsescens)、炭疽菌(Bacillus anthracis)等革兰氏阴性菌、阳性菌均表现抗菌活性，抗菌活力在p mol／L级， 对供试的真菌没有表现活性。 实验表明，美洲大蠊抗菌肽有良好的热稳定性，耐酸碱．pH5．9范围内能 够较好的保持活性，在常温下放置较长时问尚可保持微弱的活性，反复冻融对 样品的活性有影响。 对诱导后虫体生化实验表明，诱导前后蛋白质含量有明显的变化，在诱导 后24小时，蛋白质含量降到最低水平，从2332．67mg／ml下降到2121．34mg／ml， 随后开始逐渐增加，到120小时后，基本恢复到诱导前水平。 诱导24小时后，总氨基酸含量明显下降，诱导72小时后，下降达到最低， 而此时，抑菌实验表明，虫体中具抗菌活性的个体比例以及抗菌活力均达到最 高。随后，虫体中具抗菌活性的个体比例以及抗菌活力均开始逐渐下降，而总 氨基酸的含量由此开始增加；诱导144小时后，总氨基酸含量基本恢复到接近 诱导前的水平。同时，成虫体内的酯酶同功酶含量也发生明显变化。 对成虫诱导后不同部位的实验结果表明，头、胸部和足均没有新蛋白的产 生，但在头部却有一种物质的含量明显增加，胸部和足有一些条带消失。腹部 和血淋巴均有新的物质产生。用头部、胸部和足的研磨液进行抑茵实验，均未 发现抑菌活性，说明抗性物质的产生主要是在血淋巴中。 在诱导24小时后，脂肪体含量较未诱导个体略有增加，72小时后，含量 增加达到最大值，随后开始下降，与总氨基酸含量的变化趋势正相反。取脂肪 体的冰浴研磨液离心后进行抑菌实验，未表现抑菌活性。 电镜观察，美洲大蠊抗菌肽首先作用于细菌的外壁层，造成外壁层的凹陷， 穿孔，导致内容物外泄，最后菌体崩解。 本文对美洲大蠊抗萄／lt抗菌肽进行了初步研究，其结果丰富了抗菌肽的类 群，同时，为这种抗萄肽的进一步研究莫定了基础。 关键词：美洲大蠊抗菌肽 诱导 纯化 抗菌效应 抑菌机制 2 福建农林大学博士论文Abstract 福建农林大学博士论文 Abstract Study on insect antibacterial peptides has been made great progress in recent years．The insects used in the investigations belong to Holometabola including Lepidoptera and Diptera．The present paper deals with Periplaneta americana L．，a hemimetalolous insect，as study material at the first time．．Induction，isolation,purlfy, antibacterial activity and biochemistry of antibacterial peptides of PerCplaneta americana L．were studied． Antibacterial activity of hcmolymph induced by E coli，deltamethdn，insect physiology salt solution,ultraviolet ray and ultrasonic wave were conducted．The results show activity induced by Edcherichia coil Was the best．Deltamethrin was the second．The important tlling is that deltamethrin can be used conveniently． Antibacterial acti—ty of hemolymph of只aHnerictma L induced by Escerichia coli strain kss was effected by its sex，developmental stage and age．Survival rate of young nymphs after being induced was minimum，and their antibacterial activity in hemolymph WaSh’t found．Survival rate ofind