梅花种质资源的亲缘关系分析和遗传多样性分子评价-植物学专业毕业论文.docxVIP

堕堕亘室缩略符号 堕堕亘室 缩略符号 英 文 中文意义 AFLP Amplified fragment length polymorphism 扩增片断长度多态性 AMO、，A Analysis of molecular variance 分子方差分析 cpDNA Chloroplast DNA 叶绿体DNA ISSR Inter-simple sequence repeat 简单重复序列间 n丐 Intcrgenic transcribed space 内转录间隔区 GD Genetic Distance 遗传距离 Nj Neighbourooining 邻接法 0．D． Optical density 光密度值 PAGE Polyacrylamide gel electrophoresis 聚丙烯胺凝胶电泳 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PlC Polymorphic information content 多态性信息含量 PC Primer combination 引物对 PCA pnncipal component analysis 主成分分析 RAPD Randomly amplified polymorphic DNA 随机扩增多态性DNA RFLP Restriction fragment length polymorphism 限制性酶切片断长度多态性 rpm Revolutions per minute 转／分钟 SDS Sodium dodecyl sulfale 十二烷基硫酸钠 SM Simple matching coefficient 简单匹配系数 SSR Simple sequence repeat Microsatellite 简单序列重复／微卫星 TBE Iris／Boric acid／EDTA buffer Iris硼酸缓冲液 TE Tris EDTA buffer Tris碱．EDTA缓冲液 11ris Trihydroxymethyl aminomethane 三羟基氨基甲烷 UPGMA Unweighted pair-group，arithematic averages 非加权类平均距离 华中农业大学2005届博士学位论文中文摘要 华中农业大学2005届博士学位论文 中文摘要 1梅花AFLP体系构建和引物筛选 梅花(mnits mume，2n=16)属于蔷薇科(Rosaceae)，Prunoidese亚科，李属 (Prunus L)植物，在中国、朝鲜和日本是著名的早春开花的观赏植物。AFLP是 目前研究物种遗传变异常用的分子标记之一，它首次应用于梅花种质资源的遗传多 样性和亲缘关系的研究。本研究采用EcoR I／Pst I限制性内切酶组合酶切梅花基因组 DNA的AFLP实验流程。从256对AFLP引物中筛选出10对多态性位点最高的引 物，这些引物扩增出高的多态性位点在‘雪梅’等14个梅花品种中具有可靠的重复 性，共扩增出清晰可记录524个位点，其中233个为多态性位点，多态性位点的百 分率从35．71％到59．67％之间不等，平均百分率为44．46％，可用来分析更多梅花 品种之间的遗传关系。AFLP是一种效率高、花费适中、节约时间、但操作比较复 杂的研究梅花遗传分化的技术。 2应用AFLP初步探讨梅花品种间的亲缘关系 应用AFLP技术初步研究了1个半野生种，1个杂交子代和18个梅花品种，代 表梅花主要类、型，共计20株梅花的亲缘关系，19对选择性引物扩增出清晰的总 位点数为918个，其中多态性位点324个，多态性位点百分率为35．29％。采用SAS 类平均法聚类分析AFLP数据，九值为0．9759时，将20株梅花分为四个类群。半野 生‘曲梗梅’的多态位点数最高，‘多萼朱砂’、‘复瓣小宫粉’等梅花品种次之。在类群 Ⅳ中，具有明显亲缘关系的两组杂交亲本及其子代各自聚为一组，表明AFLP技术 和聚类分析方法可以用来研究梅花品种间的亲缘关系。‘小宫粉’、‘江南朱砂’和它们 的子代亲缘关系密切，聚类分析结果仍能区别其较小差异，这有助于解决梅花中不 同产地相同品种异名和同名而品种不同的情况。垂枝类梅花品种间有较近的亲缘关 系或者遗传来源，支持枝姿作为梅花分类的重要形态特征，垂枝类品种属于梅花中 比较进化的类群与其历史演化记录相吻合。本研究中所采用的DNA限制性内切酶 酶切组合及所筛选的AFlP引物对适合研究梅花品种间的亲缘关系和遗传多样性。 3 AFLP技术对梅花杂交种的快速鉴定 应用银染法AFLP鉴定以父本‘多萼朱砂’与母本‘雪梅’杂交所得12株F1 子代。以E-AT／尸一AT选择性引物对扩增，父本180bp左右的特异带在12株Fl代中 都呈