氯霉素在罗非鱼体内的药物代谢动力学及残留研究-水产养殖专业毕业论文.docxVIP

I：海水产大学学位论文2003年6月氯霉素在罗非鱼体内的药物代谢动力学及残留研究 I：海水产大学学位论文2003年6月 氯霉素在罗非鱼体内的药物代谢动力学及残留研究 摘要 本文通过建立高效液相色谱(RP-I--IPLC)和气相色谱检测法 (GC．ECD)，对氯霉素在尼罗罗非鱼体内的药物代谢动力学及残留 消除进行了研究。 给药前取罗非鱼血浆、肌肉、肝脏和肾脏空白样品，并应用反 相高效液相色谱法建立了氯霉素在四种组织内含量的测定方法。血 浆经甲醇去蛋白，10000 r-min。1离心10min；其它组织样高氯酸提取， 正己烷去脂肪后4000 r．min1离心10min。上清液过滤后进样。色谱 柱：反相ODS(15cmx4．6mm，50m)i流动相为甲醇：水=35：65(v ／v)；流速为1 mL·min-1；柱温：40C；进样量：10皿；DAD检测波 长，278nm。研究表明，本法线性关系与重复性良好；血浆、肌肉、 肝脏和肾脏平均回收率分别为90．474-3．42％，64．704-2．19％， 107．48-4-5．42％和104．184-4．20％，其变异系数均小于8．00％，日内精 密度范围为0．992-2．024％，日间精密度为1．77％，所建立的RP-HPLC 方法适合药动学样品分析要求。 在建立了上述HPLC分析方法基础上，研究了氯霉素在吉富尼罗 罗非鱼血液、肝脏、肌肉和肾脏的吸收分布代谢和消除。实验在水温 为26。C的淡水中以50mg-kgJ鱼体重的剂量口服给药进行。药时浓度 数据通过MCPKP药物动力学软件分析。实验表明：氯霉素能大量的 被迅速吸收，四种组织中氯霉素的浓度最符合一级吸收的二室开放模 上海水产大学学位论文2003年6月型。峰浓度的从快到慢顺序依次为肾脏肝脏血浆肌肉。肾脏中达 上海水产大学学位论文2003年6月 型。峰浓度的从快到慢顺序依次为肾脏肝脏血浆肌肉。肾脏中达 到峰浓度(c。。。14．1291．tg·mL。)在1．782h，肝脏在2．989h达到C。。。 25．2191．tg·mE-I比其他组织峰浓度均高，血浆c。。21．73699·mLJ和肌 肉C。。。13．0191xg·g。分别在3．494和7．325h。血液、肝脏、肌肉和肾 脏的AUC分别为334．300，428．920，746．840，565．4501．tg·h／mL，血液、 肝脏、肌肉和肾脏的消除半衰期分别为50．721，94．085，127．840和 127．961h，由此可以知氯霉素在组织的消除速度很慢，这也是应全面 禁用氯霉素的一个重要原因。 比较了不同水温下，氯霉素在不同年龄(一龄和二龄)的吉富尼 罗罗非鱼血液、肝脏、肌肉和肾脏的吸收、分布、代谢和消除。实验 在水温为26 9C和18(2的淡水中以50 mg·Kg‘1鱼体重的剂量口服给药 进行。药时浓度数据通过MCPKP药物动力学软件分析。实验表明： 氯霉素能大量的被迅速吸收，其药动学特征均最适合用带一级吸收的 二室开放模型，其主要药动学参数分别为：Tl，2 h0．985h、2．809h和 1．059h；Tllza6．521、8．865和7．731h；AUC分别为334．300、583．410 和599．820mg／L．h；Tp分别为3．494、7．756和4．196h；C，。分别为 21．736、20．513和24．070；CLs分别为0．150、0．086和O．083L／kg·h： Tl，2 B分别为50．721、65．402和118．477 h。结果表明，温度升高，吸 收、分布和消除速度则明显加速；一龄罗非鱼Lt-龄罗非鱼吸收速度 明显快，分布半衰期和AUC大小比较接近，但消除明显缓慢。 建立了一种气相色谱一电子俘获器(GC-ECD)对吉富尼罗罗非 鱼肌肉中的氯霉素含量测定方法。样品经乙酸乙酯提取，离心，蒸发， 上海水产大学学位论文2003年6月重新溶解在甲醇和4％的氯化钠混合溶液中，用正己烷脱脂，然后通 上海水产大学学位论文2003年6月 重新溶解在甲醇和4％的氯化钠混合溶液中，用正己烷脱脂，然后通 过c18固相柱(SPE)，用乙氰：水(VⅣ=5：95)洗柱后，乙氰的洗脱液 经蒸发后，最后Sylon BFT对其衍生0．5h。采用外标法进行定量，线 性和重复性良好。在空白样品中添加0．1，l，10，100 1．tg·k91的氯霉素 标准品的平均回收率为82．675士9．881％，变异系数小于10％，方法的 最低检测限量为0．1岭·kg～，平均提取精密度，日内精密度和日间精 密度分别为9．170％，2．838％和5．550％，验证了该方法的有效性， 提示本方法可为食品中的残留监测工作提供借鉴。 口服CAP后，在水产动物体内存在潜在的药物残留的可能。在 建立了上述GC—