迷迭香酸诱导HepG2细胞凋亡机制的研究-中西医结合基础专业毕业论文.docxVIP

迷迭香酸对 迷迭香酸对 HepG2 细胞凋亡机制的研究 PAGE PAGE 10 摘 要 目的：探讨迷迭香酸诱导 HepG2 细胞凋亡的作用及机制。 方法：1. 用 MTT 法测定不同浓度的迷迭香酸作用于 HepG2 24h、48h 和 72h 后，细胞 的生长抑制作用，并用显微镜观察细胞形态变化。2. 用流式细胞仪检测不同浓度的迷迭 香酸分别作用于 HepG2 24h、48h 后的细胞凋亡，并计算其凋亡率。3. 用流式细胞仪法 检测不同浓度的迷迭香酸分别作用于 HepG2 24h、48 h 之后的细胞周期改变。4. 用 Western Blotting 法检测迷迭香酸作用 HepG2 48h 对 P53、c-Myc 、PARP 蛋白表达的影 响。 结果：1. 6.25、12.5、25 和 50μg/ml 浓度的迷迭香酸对 HepG2 细胞作用 24、48h 后，在 迷迭香酸作用 48h 后对 HepG2 的生长有抑制作用，细胞出现明显的皱缩、聚集等一些 形态学改变 ，贴壁细胞明显减少。IC50 值为 46.973±1.709 μg/ml。2. 6.25、12.5、25μg/ml 浓度的迷迭香酸作用于 HepG2 细胞 24h、48h 后，发现迷迭香酸作用 48h 后对 HepG2 细胞的早期凋亡方面有作用。3. 6.25、12.5、25 和 50μg/ml 迷迭香酸作用于 HepG2 24h、 48h 后，与对照组比较，加药组在作用 HepG2 细胞 48h 后 G0/G1 期细胞比例增加。4. 6.25、 12.5、25 和 50μg/ml 迷迭香酸作用于 HepG2 48h 后，PARP、c-Myc 的表达随迷迭香酸浓 度的增加而降低，P53 的表达随迷迭香酸浓度的增加而增高。 结论：1. 迷迭香酸会剂量依赖性的对肝癌细胞增殖产生抑制。2. 迷迭香酸将 HepG2 细 胞阻滞在 G0/G1 期。3. 迷迭香酸可以通过对抑癌基因 P53 的激活，对原癌基因 c-Myc 及对 PARP 蛋白的切割，促进 HepG2 细胞发生凋亡。 关键词: 迷迭香酸；HepG2；肝癌；凋亡 ABSTRACT Purpose: To explore the effect and the related mechanism on the apoptosis of HepG2 cell induced by rosmarinic acid and the related mechanism. Methods: 1. MTT method was used to determine the inhibition effects on the growth of HepG2 cells after rosmarinic acid treat for 24hhours, 48hours and 72hours, and the cell shapes change was observed with the microscope. 2. Flow cytometry was used to test the cell apoptosis. 3. Flow cytometry was used to determine the change caused by rosmarinic acid. 4. Werstern Blotting was used to check the P53, c-Myc, PARP protein expression of HepG2 after rosmarinic acid treatment. Results: 1. HepG2 cell growth was inhibited by 6.25,12.5,25 and 50μg/ml rosmarinic acid for 24 and 48 h. Meanwhile, the cell shape was changed to shrinking and aggregation. IC50 is 46.973±1.709 μg/ml. 2. HepG2 cell growth was inhibited by 6.25,12.5,25 and 50μg/ml rosmarinic acid for 24 and 48 h. Meanwhile, rosmarinic acid had the effect on early apoptosis of HepG2 cells. 3. HepG2 cell growth was inhibited by 6.25,12.5,25 and 50μg/ml rosmarinic acid fo