沙枣果肉原花青素的分离、鉴定与抗氧化研究-食品科学专业论文.docxVIP

沙枣果肉原花青素的分离、鉴定与抗氧化研究摘 沙枣果肉原花青素的分离、鉴定与抗氧化研究 摘 要 原花脊素是广泛存在于植物中的一大类多酚化合物，是近年来不断研究开发的 一种极强的体内活性功能因予。许多研究表明，原花青素具有较强的抗氧化能力、 清除自由基能力和较好的药理活性，目前国外正将其广泛应用于保健品、药品和化 妆品等领域。在原花青素研究领域，葡萄一直是人们所密切关注的研究对象。1997 年，由葡萄籽原花青素提取物所制成的OPC保健品，商品名为葡乐安，已在美国市 场畅销，并受到极大欢迎。尽管原花青素保健食品在国外蓬勃发展，但在我国作为 进口保健食品，价格仍十分昂贵，所以利用我国资源的优势，从更多的植物中提取 天然抗氧化剂OPC是追在眉睫的任务。 沙枣果肉营养十分丰富，其含糖量高、氨基酸种类齐全、矿物质营养丰富，并 含有一定量的淀粉、果胶和有机酸，同时含有微量的黄酮类物质、尼克酸、硫胺素、 核黄素和胡萝卜素等，对满足人体的需要都是非常重要的，但目前对沙枣原花青素 的研究却鲜有报道。华中农业大学食品科技学院谢笔钧教授实验室曾有人对沙枣原 花青素作过一些研究，本课题旨在进一步对沙枣果肉原花青素(Elaeagnus angustifolia．LJujubes sarcocarp procyanidins，简称ESPC)的提取、分离、纯化、鉴 定、抗氧化性能及清除·OH效果作出研究，以期发现更多的原花青素天然植物资源， 并希望对沙枣的进一步开发利用起到一定的推动作用。 本研究的主要研究成果如下： (1)首先测定了沙枣果肉中蛋白质、脂肪等主要营养成分的含量，并采用 BuOH—HCI法和F01infen—Ciocalteam法对ESPc含量进行了测定，结果表明甘肃武 威小果型沙枣果肉原花青素含量较高，很有研究意义，所以确定为实验材料。 (2)对EsPc的提取工艺进行了初步探讨，通过单因素实验，在中心组合实验 基础上，运用响应面分析法得出了提取ESPC的最佳工艺条件：提取温度76．30(2、 提取时间85．93min、乙醇浓度72．18％、提取液pH5、料液比l：9、提取3次。在此 条件下提取率达90％以上。 (3)在最佳提取工艺条件下，采用固相萃取的方法对沙枣果肉提取物中原花青 素进行了纯化，产物纯度为89．9l％，原花青素的得率为4．23％；并采用乙酸乙酯 萃取法和石油醚沉淀法进一步对固相萃取后的ESPC粗提物进行了精制。结果表明， 乙酸乙酯萃取和石油醚沉淀的分离效果明显，并由此得到了四种不同类型的ESPC提 华中农业大学2005届硕士研究生毕业论文取物，即乙酸乙酯萃取物、乙酸乙酯萃取水相提取物、石油醚沉淀物和石油醚沉淀 华中农业大学2005届硕士研究生毕业论文 取物，即乙酸乙酯萃取物、乙酸乙酯萃取水相提取物、石油醚沉淀物和石油醚沉淀 水相提取物。 (4)采用IR、HPLC等手段对ESPC粗提物、乙酸乙酯萃取物、乙酸乙酯萃取水 相提取物、石油醚沉淀物、石油醚沉淀水相提取物五种不同类型的ESPC提取物的分 离鉴定进行了深入研究。结果表明，石油醚沉淀和乙酸乙酯萃取的分离效果较好， 石油醚沉淀物与乙酸乙酯萃取物中富含原花青素二聚体和三聚体，两者相应的水相 提取物中则大部分为原花青素高聚物和其他一些杂质。 (5)ESPC抗氧化性能的测定：共设计了如下三组实验，即①不同ESPC添加量 对猪油抗氧化性的影响；②ESPC与其他抗氧化剂(Vc、柠檬酸、酒石酸)抗氧化性 的比较；③ESPC与其他抗氧化荆(Vc、柠檬酸、酒石酸)的协同增效作用。通过以 上三组实验发现，首先ESPC对猪油的抗氧化能力有剂量效应关系，即随着原花青素 添加剂量的增大，其抗氧化效果也增强；其次ESPC对猪油的抗氧化能力优于vc、 柠檬酸和酒石酸，对比测定的结果为ESPCVc柠檬酸酒石酸：另外发现ESPC 的抗氧化性能与抗坏血酸、柠檬酸和酒石酸具有协同增效作用，增效作用的强弱顺 序为Vc柠檬酸酒石酸。以上分柝表明ESPC具有很强的抗氧化能力，并且和其 他抗氧化剂混合使用时抗氧化作用增强。 (6)最后对ESPC粗提物(A。)、乙酸乙酯萃取物(m)、乙酸乙酯萃取水相提取 物(凡)、石油醚沉淀物(A．)、石油醚沉淀水相提取物(A5)五种不同类型的ESPC 提取物的清除。OH效果与茶多酚(TPE)、葡萄籽原花青素(GSPC)进行了对比测定， 对比测定的结果为：GSPCA。A：A．A3A；TPE，五种不同类型的ESPC提取物 的·OH清除率均在88％N上，均大于TPE的·OH清除率88．03％，其中石油醚沉淀物 的·OH清除率为98．5％，仅次于GSPC的·OH清除率99．57％。表明这五种不同类型的 ESPC提取物均具有很强的清除·OH自由基的活性。因此，沙枣提取物作为一种有效 的自由基清除剂，