清开灵对兔实验性葡萄膜炎治疗机制研究.docVIP

清开灵对兔实验性葡萄膜炎治疗机制研究 刘静霞 张晓冬 吕瑞民 聂浩劫 陈德欣 张魁魁 陈大颖 （黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040） 【中图分类号】R771 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 （2010） 20-0077-03 【摘要】目的 观察清开灵注射液对葡萄膜炎的防治作用与机制。方法40只 实验兔随机均衡分为正常组、模型对照组、激素治疗组、清开灵治疗组，分5 个不同时段检测兔眼炎症积分及房水和外周血中IL?2、TNF-alpha;含量。结果 造模后不同时段各组兔眼部炎症积分逐渐增加，房水和外周血中IL-2TNF-alpha; 逐渐升高，与正常组比较差异有统计学意义（P0.001）；清开灵治疗组不同时 段各项指标均明显低于模型组（P0.01）,与激素治疗组疗效相似（Pgt;0.05）o 结论清开灵注射液具有控制并改善兔实验性葡萄膜炎临床体征，抑制房水和外 周血中IL?2、TNF-alpha;的作用，在一定程度上与激素疗效相近，可作为葡萄膜 炎的治疗用药。 【关键词】清开灵注射液实验性葡萄膜炎细胞因子体征 葡萄膜炎是一类十分常见的致盲眼病，在我国致盲眼病中约占第3?7 位?2],长期以来，西医治疗本病多以糖皮质激素或免疫抑制剂为主，因其相 应的毒副作用而使临床应用受到局限，故开发中药治疗葡萄膜炎前景看好。清开 灵注射液是近年来常用于治疗热性疾病的一种新型中药制剂，其主要药物成份具 有显著抗炎作用，月?无激素类副作用，但尚缺乏对其治疗葡萄膜炎作用的实验研 究。木课题旨在通过动物实验研究，探讨葡萄膜炎的发病机理和清开灵治疗葡萄 膜炎的疗效与作用机制，现报告如下。 1.实验材料 1.1动物 健康成年新西兰大白兔40只，雌雄各半，无眼疾，体重2.2? 2.5kg,常规分笼饲养（黑龙江中医药大学动物实验中心提供）。 1.2药物 清开灵注射液（广州明兴制药有限公司生产，规格10ml/支）、 地塞米松、9/L生理盐水均为同一产家、同一批号药品。 1.3主要试剂与仪器4%BSA（天象人生物工程有限公司），IL?2、 TNF-alpha;放免药盒（北京普尔伟业生物科技有限公司），均为同一批号；YZ-5B 裂隙灯显微镜、检眼镜（苏州医疗仪器厂）、MX全自动荧光免疫分析仪（美国 ABBOTT公司），高速低温离心机（日本日立公司）、低温冰箱（日本三洋公司）等o 2 .实验方法 2.1造模方法 参照吴树扬等人方法［3］用BSA作异体抗原，玻璃体及耳 缘静脉二次注射法诱导实验性葡萄膜炎动物模型。 2.2分组与给药方法40只兔随机均衡分成4组，每组10只，雌雄各 半，体重相近。 （1） 正常组：不造模。 （2） 模型对照组：造模后第2天开始予同清开灵治疗组等体积的生理盐 水耳静脉注射，每日1次，连续2周。 （3） 激素治疗组：造模后第2天开始按每日10mg剂量予地塞米松注射 液耳静脉注射，每日1次，连续2周，根据实验动物与人体体表面积换算表⑷ 换算确定给药量。 （4） 中药治疗组：造模后第2天开始按每日30ml予清开灵注射液耳静 脉注射，每日1次，连续2周，剂量换算方法同激素组。 2.3观察指标及检测方法 2.3.1炎症积分评价 分别于造模后第1、3、7、10、14天用裂隙灯显 微镜及检眼镜检查各兔眼部体征，按0?4级标准⑸评价记录炎症积分。 2.3.2房水及外周血细胞因子检测：各组造模前、造模后第1、3、7、10、 14天分别抽取房水0.5ml、耳缘静脉血2ml（分离血清），置?20°C保存备用。采用 放免法测定房水及外周血中细胞因子IL-2和TNF-alpha;含量。 2.4统计学方法 数据以均值plusmn;标准差表示，采用SPSS16.0统计 软件进行方差齐性检验和显著性检验，各时段组间均数以及组内均数比较分别釆 用随机区组设计的单因素和两因素ANOVA方差分析检验后进行L S D- t检验 或近似t检验、配对t检验，检验水准alpha;=0.05 (双侧)，P0.05具有统计 学意义。 3 ?结果 3.1不同吋段各组兔眼部炎症积分评价 造模后1?14天模型对照组炎症积分不断增高(P0.001),表明本实 验中BSA诱导兔眼葡萄膜炎体征可持续加重2周以上。激素治疗组和清开灵治疗 组兔眼炎症积分分别自第7天和第10天呈下降趋势，至第14天最低，治疗前后 比较均有统计学意义(P0.001)；从第7天以后两治疗组兔眼炎症积分均明显低 于模型对照组(P0?01),但两治疗组间差异无统计学意义(Pgt;0.05)o 3.2不同时段各组兔血清中细胞因子的变化 正常组兔外周血中IL-2具有一定表达，其前后吋段差异及其与其它三组 造模前比较均无统计学意义(Pgt;0.05)o造模后三组兔外周血IL?2自第1天开 始逐渐升高，各吋段