甘蓝型油菜生物素羧基载体蛋白基因的克隆与结构分析.docVIP

PAGE 1886 中 国 农 业 科 学 40卷 9期 戴晓峰等：甘蓝型油菜生物素羧基载体蛋白基因的克隆与结构分析 PAGE 1885 中国农业科学 2007,40(9):1883-1889 Scientia Agricultura Sinica 收稿日期：2006-05-31；接受日期：2006-08-15 基金项目：国家自然科学基金项目，国家“973”项目（2006CB101600），国家“863”项目（2006AA 作者简介：戴晓峰（1980-），女，河南郑州人，研究方向为油菜分子生物学。通讯作者卢长明（1959-），男，江西鄱阳人，研究员，博士，研究方向为基因工程与转基因安全。Tel：027E-mail：cmlu@oilcrops.cn 甘蓝型油菜生物素羧基载体蛋白基因的克隆与结构分析 戴晓峰，卢长明，吴 刚，武玉花，肖 玲 （中国农业科学院油料作物研究所，武汉430062） 摘要：【目的】生物素羧基载体蛋白负责将羧基从生物素羧化酶转移到羧基转移酶上，对于长链脂肪酸的从头合成与种子含油量的形成具有十分重要的作用。本研究的目的是从甘蓝型油菜品种基因组DNA中分离生物素羧基载体蛋白（BCCP）基因的全长编码区序列，通过生物信息学分析揭示该基因的结构特征（包括内含子的数量、长度与分布，蛋白质保守区疏水性特征等）和功能关系。【方法】基因克隆采取同源序列法进行。【结果】分离得到的bccp基因全长均为1 600 bp左右，根据其结构特点可以分成3种类型，它们均包含5个内含子。bccp1基因编码的蛋白质具备完整的生物素化功能结构域，是唯一功能完整的基因序列；bccp2和bccp3由于移码突变造成蛋白合成提前终止，翻译的蛋白质均缺少生物素化结构域。【结论】本研究首次从中国冬油菜品种中克隆获得bccp基因的全长序列并揭示了其序列特征，为进一步利用该基因开展含油量的基因调控研究提供了科学依据。 关键词：脂肪酸合成；生物素羧基载体蛋白（BCCP）；基因克隆；基因结构分析；甘蓝型油菜 Gene Cloning and Structural Analysis of Biotin Carboxyl Carrier Protein Encoding Gene in Brassica napus DAI Xiao-feng, LU Chang-ming, WU Gang, WU Yu-hua, XIAO Ling (Oil Crops Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 430062 Abstract: 【Objective】Acetal-CoA Carboxylase (ACCase) catalyzes the first step in de novo biosynthesis of fatty acids. Biotin carboxyl carrier protein (BCCP), as one of the subunits of plastidial ACCase, controls the transfer of carboxyl from acetyl-CoA carboxylase to carboxyltransferase. This study is designated to isolate bccp genes from genomic DNA of Brassica napus and reveal the structural aspects and functional relevance of these genes, including gene length, intron distribution, conserved hydrophobic regions etc. 【Method】 Homologous sequence amplification method was used in gene isolation.【Result】Three isoforms of bccp genes in full length were obtained. Only one isoform bccp1 encodes a protein which is full in length and contains the domain for biotinylation, while the other two isoforms bccp2 and bccp3 encode protei