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※分析检测 食品科学 2011, Vol. 32, No. 04 203
1 2 1 1 1 1 1
易海华 ,祝长青 ,宋阳威 ,孙慧宇 ,房 超 ,王云飞 ,徐 波 ,
1 1 3 1 ,
吴萍兰 ,徐 政 ,徐继承 ,赵金伟 *
(1.徐州出入境检验检疫局技术中心,江苏 徐州 221006 ;2.江苏出入境检验检疫局,江苏 南京 210000 ;
3.徐州医学院公共卫生学院,江苏 徐州 221000)
目的:建立一种快速、简单地检测食品中单增李斯特菌的环介导恒温基因扩增方法(loop-mediated isother-
mal amplification ,LAMP) ,并初步建立荧光定量LAMP 检测单增李斯特菌的方法。方法:根据 LAMP 方法的原
理,设计 LAMP 检测引物,建立 LAMP 检测方法,同时对方法的特异性、灵敏度、重复性及初始拷贝数的对数
值与反应时间之间的线性关系进行评估。结果:使用 LAMP 引物可以在0.5h 内完成检测工作;LAMP 检测技术的
灵敏度高出聚合酶链式反应检测技术 100 倍以上,检出限达到 1.72 ×101 拷贝 / 反应,与其他食源性致病菌无交叉
反应,平均实验间变异系数小于 5% ;反应时间与初始模板浓度的常用对数值有良好的线性关系(R 2=0.9994) 。结
论:本方法具有快速、灵敏、特异、操作简单、设备要求低的特点,具有广阔的应用前景。
单增李斯特菌;环介导恒温基因扩增方法;快速检测
Detection of Listeria monocytogenes in Foods Using Loop-mediated Isothermal Amplification
1 2 1 1 1 1
YI Hai-hua ,ZHU Chang-qing ,SONG Yang-wei ,SUN Hui-yu ,FANG Chao ,WANG Yun-fei ,
1 1 1 3 1,
XU Bo ,WU Ping-lan ,XU Zheng ,XU Ji-cheng ,ZHAO Jin-wei *
(1. Technology Center of Xuzhou Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Xuzhou 221006, China ;
2. Jiangsu Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Nanjing 210000, China ;
3. School of Public Health, Xuzhou Medical College, Xuzhou 221000, China)
Abstract:Objective: To develop a rapid and simple method for qu
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