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凯基生物科技发展有限公司 电话：02552880811
传真：025 细胞凋亡研究实验手册
目录
1 凋亡分析策略与产品的选择指南.
2 常用凋亡检测产品和方法
2.1 凋亡形态学检测试剂盒系列（荧光/光学法）
2.2 Annexin-V-FITC/EGFP检测试剂盒.
2.3 TUNEL 凋亡原位检测试剂盒
2.4 DNA LADDER 检测试剂盒.
2.5 细胞DNA含量检测试剂盒（细胞周期）.
2.6 Caspase 活性检测试剂盒 .
2.7 线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）
2.8 端粒酶活性检测试剂盒..
2.9. 凋亡与氧化应激检测.
2.10 凋亡相关蛋白检测（蛋白定量、蛋白抽提、WB ECL.产品简介）
2.11 凋亡相关基因检测（分子生物学产品产品简介）.
附1：流式细胞仪和荧光显微镜的使用方法
附2：常用凋亡诱导剂
附3 不同荧光试剂检测波长表.
附4 凋亡相关试剂盒选择参考
1 凋亡分析策略与产品的选择指南
凋亡分析总体原则：
1）因为凋亡是多因素、多通路参与的过程，不能根据单一指标来判断细胞凋亡；所以需进行多指标同时检测；
2)由于凋亡细胞不同时间出现的凋亡事件不同；而每个指征维持有一个时间段，所以需要在不同的时间点进行采样，以保证检测结果的准确性；
3）实验需要设定阳性和阴性对照，避免出现假阳性或者假阴性。
刚开始着手分析凋亡时，整体试验方案的设计至关重要，试验方案设计主要从以下几个方面考虑：
一：总体方案设计
研究目的 检测指标 凯基相关产品选择指南
1
1 KGA-501/2，211-217 KGA-220
2 KGA-101-108
3 KGA-701-704/111-113
4
：
1
1 KGA-101-108
2 KGA-511-512
3凋亡诱导剂、 KGA601-604 KGA-201-4。301-4，401-4，KGA-101-108 211-217 111-113
1 KGA601-604；KGA401-4044
1 KGA601-604；KGA401-4044
2 KGA 301-304
3 KGP系列（蛋白抽提 蛋白定量试剂盒）
4 KGP系列（WB/免疫组化）
1线粒体通路：JC-1染色 Caspase 9活性等
2死亡受体通路：Caspase 8活性等
3内质网通路；Bap31等
C各通路相关分子详见表1）
C：判断凋亡信号通路：是内源线粒体通路？还是外源死亡受体通路？或内质网通路？
1 Annexin V流式细胞仪
1 Annexin V流式细胞仪分析
2 DNA含量分析、等
3 （有关凋亡不同时期发生的分子事件请参见附图2）
B：判断凋亡的时期或数量（定量分析）
A： 判断细胞的死亡
是凋亡？还是坏死？
（定性分析）
1 细胞形态学观察
2 Annexin V荧光显微镜分析
3 TUNEL法/ DNA Ladder分析
4 Caspase 3活性分析
PR-PCR试剂盒等分子生物学系列 KGP系列（蛋白抽提、蛋白定量3 KGP系列（WB）4 KGP系列（免疫组化）1 MYC通路
PR-PCR试剂盒等分子生物学系列
KGP系列（蛋白抽提、蛋白定量
3 KGP系列（WB）
4 KGP系列（免疫组化）
1 MYC通路（P53 ARF等）
2 NF kappa B 通路
3 JNK通路
4 ARK通路
D：判断各通路具体的分子调控机制
二：按照凋亡发生的时间顺序检测
附图2 凋亡不同时期发生的分子事件
凯基相关产品：1 诱导凋亡：凯基凋亡诱导剂
2 受体活化：凯基膜蛋白抽提试剂盒/WB相关产品
3 细胞色素C检测试剂盒
4 线粒体膜电势降低： 线粒体膜电位检测试剂盒（JC-~1）
5 Caspas的活性： Caspas 3 8 9 2 6等化学发光法检测试剂盒
6 细胞膜磷脂酰丝氨酸PS暴露：Annexin v —FITC/EGFP检测试剂盒
7 形态学改变：凯基凋亡形态学检测试剂盒（光学或荧光用）
8 DNA片断化：TUNEL和DNA Ladder检测试剂盒
四 根椐实验材料类型选择检测方法和产品 （详见附录5）
实验材料类型
检测方法或产品
1 细胞 ：
Annexin v —FITC
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