细胞生物学17 干细胞.ppt

End Thanks * * 表皮生长因子：epidermal growth factor，EGF 成纤维细胞生长因子-2：fibrolat growth factor-2，FGF-2 1．间充质干细胞的位置 间充质干细胞附着于骨髓窦的内腔面，形成 一种包埋于窦状网络中的三维细胞网络。 * * 2．MSC的分离与表面标志 (1)分离： 骨髓抽提物取1.073/ml密度界面上的细胞，贴壁生长的细胞中95~98%为MSC。根据细胞表面抗原获得MSC。 * * (2)MSC的特异性表面标志 通过流式细胞仪分析，间充质干细胞特异性表面抗原有：SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、CD124。 * * 3．间充质干细胞的分化方向 间充质干细胞可分化为多种间充质组织。如骨、关节、脂肪、肌腱、肌肉、骨髓基质等。 来源不同或在不同条件下，间充质干细胞可分化相应组织细胞。 * * 如骨髓中的间充质干细胞可分化脂肪细胞、软骨细胞和成骨细胞。 在含有1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、地塞米松、吲哚美辛的培养基中，95%间充质干细胞分化为脂肪细胞。 在含TGF-β3的无血清培养基中，间充质细胞会分化为软骨细胞。 * * 由于间充质细胞在体外可以相对容易地诱导出骨细胞、软骨细胞，可在骨损伤、先天性骨畸形有治疗中有广泛应用。 * * 三、神经干细胞 传统观点：神经细胞无再生能力。 新发现：中枢神经系统中部分细胞仍具有自我更新及分化产生成熟脑细胞的能力，这些细胞被称为神经干细胞。 * * 1．神经干细胞的存在部位 哺乳动物中脑侧室的室管膜下区包括室管膜的细胞中存在有增殖能力的干细胞。 成体的下脑室区、嗅球及海马区是神经干细胞存在的部位。 * * 2．神经干细胞的生化特性 神经干细胞表达巢素蛋白，所有的神经干细胞都巢素蛋白阳性。 巢素蛋白的表达始于神经胚形成期，当神经细胞迁移基本完成后，合成开始下降，神经细胞完成分化，巢素蛋白表达停止。 * * 3．神经干细胞的维持与分化 (1)促进细胞增殖的因素： 表皮生长因子(EGF)，成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)，对干细胞的存活、增殖和分化起重要作用。 EGF的主要作用是维持神经干细胞生存； FGF-2主要是以对细胞分化起作用。 * * (2)促进神经干细胞分化的因素：小牛血清。 用小牛血清替代EGF培养神经干细胞，细胞分化为星形胶质细胞、少突状细胞和神经元；巢素蛋白逐渐减少，出现神经元特有的微管结合蛋白–2及胶质细胞的特征性神经胶质原纤维酸性蛋白。 * * 四、表皮干细胞 * * 1．表皮干细胞的存在部位 (1)表皮干细胞位于表皮基底层。属于专能干细胞。能周期性的进入分化程序，最终分化为角质细胞。 (2)表皮增殖单位：位于基底层的干细胞和分布在它周围的由它分裂形成的子细胞，共9个，组成一个柱状细胞群，称为一个表皮增殖单位。 * * (3)表皮干细胞的分化： 表皮增殖单位边缘的子细胞脱离基底膜后向上迁移经过棘细胞层和颗粒层细胞，最终形成角质化无核细胞。这层细胞不断脱落，由新生的细胞不断补充。 人体不同部位的皮肤更新速度约2~4周。在细胞迁移过程中，角质化伴随着分化过程。 * * 2．表皮干细胞的生化标志 (1)表达角蛋白5(keratin 5，K5)和K14分子：同角细胞相同。产生的角蛋白在成熟皮肤细胞中形成中间网络，使表皮细胞形成一个整体，并具有韧性。 表达整合素：与Ⅳ型胶原和纤维粘合素粘附。以这种方式与基底膜相连。当这种粘附力下降时，干细胞易从干细胞巢脱落，向表皮分化。 * * 干细胞高表达整合素和粘附素，在维持干细胞增殖和存活的信号传导途径中发挥重要作用。 毛囊干细胞的增殖潜能非常大，体外一单独的毛囊干细胞在合适的条件下产生的子细胞数多达1.7×1038，大大超过了覆盖整个成体体表所需的细胞数。 * * 五、肠干细胞 1．肠干细胞的位置 肠表面由被肠腺围绕并根植于肠壁的绒毛组成，每一肠腺大约有250个细胞，其中有肠干细胞，位于肠腺的基部或近基部。 * * 2．肠干细胞的增殖与分化 小肠绒毛上皮细胞的更新是从隐窝底部的干细胞分裂开始。 分裂成的一个子细胞保持增殖能力，返回增殖池，另一个子细胞向上迁移，并逐渐失去分裂能力，分化为上皮细胞，至绒毛顶部死亡脱落。 肠干细胞增殖缓慢(Tc≥24小时)→过渡放大细胞(Tc=11小时)→迁移并分化→死亡落入肠腔。 * * 3．肠干细胞的生化特征与分离 (1)肠干细胞表达中间纤维K8、K18、K19 (2)肠干细胞的体外培养至今未成功 * * * * 第四节 特殊类型的干细胞 精原干细胞 * * 1．精原细胞的形态特征： 精原细胞紧贴于曲细精管的基膜，圆形或卵圆形，φ12μm，核大，除核糖体外其它细胞器不