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解析:(1)①②③⑧⑨应采用消毒,④⑤⑥⑦⑩应采用灭菌, 故选 A。(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调 整 pH,培养基接种前要进行高压蒸汽灭菌,再进行倒平板。(3) 微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染,采用平板划线法 接种,需要注意的是连续划线时,每次划线前要灼烧接种环, 同时划线结束首尾区不能相连。(4)检测培养基是否被污染,对 固体培养基应采用的检测方法是将未接种(接种等量无菌水)的 培养基在适宜的温度下放置适当时间,观察培养基上是否有菌 落产生。(5)植物组织培养的 MS 培养基中需要加入植物激素(生 长素和细胞分裂素)。(6)制作泡菜时,为避免杂菌污染而向泡菜 坛中加入了青霉素结果发酵失败,原因可能是青霉素杀死了乳 酸菌。 答案:(1)A (2)调整 pH 高压蒸汽灭菌 (3)防止外来杂菌的入侵 平板划线 ①灼烧接种环 ③不连接(不重叠) (4)将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放 置适当时间 (5)植物激素(或生长素和细胞分裂素) (6)青霉素杀死了乳酸菌 接种方法 操作过程 注意事项 平板划 线法 接种环灭菌→ 取菌液→在培 养液上划线→ 培养皿倒置培 养 (1)接种环的灼烧:①第一次灼烧:避免接 种环上可能存在的微生物污染培养物;② 每次划线之前的灼烧:杀死上次划线结束 后残留在接种环上的菌种,使每次划线的 菌种均来自上次划线末端;③划线结束的 灼烧:杀死接种环上残留的菌种,避免细 菌污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌 液,以免温度太高而杀死菌种 (3) 划线时最后一区域不要与第一区域相连 (4)划线用力大小要适当,防止用力过大将 培养基划破 (1)接种方法的比较: 4.常用的微生物接种方法: 接种方法 操作过程 注意事项 稀释涂布平板法 稀释菌液→取菌 液于培养基表面 →涂布器灭菌→ 均匀涂布菌液→ 培养皿倒置培养 稀释操作:每支试管及其中 9 mL 水、移液管均需灭菌;操 作时,试管口和移液管应在离火 焰 1~2 cm 处 涂布器的灭菌:①涂布器用体积 分数为 70%酒精消毒,取出时多 余酒精在烧杯中滴尽,沾有少量 酒精的涂布器在火焰上引燃后 冷却;②不要将过热的涂布器放 在盛放酒精的烧杯中,以免引燃 其中的酒精 (续表) (2)倒平板的注意事项: ①培养基灭菌后,需冷却至 50 ℃左右,才能用来倒平板。 ②整个操作过程需在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。 ③平板冷凝后要倒置的原因:防止皿盖上的冷凝水珠落入 培养基,造成污染。 ◎ 高考探究 ◎ 考向 微生物的培养 [典例](2014 年四川卷)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期 使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降 解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如下 图甲、乙所示。(导学号 甲 乙 (1) 微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、 ________________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺 隆作为唯一碳源,其原因是_____________________________。 (2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加 生长素和______________,这些植物激素一般需要事先单独配 置成________保存备用。 (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。划线的 某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌, 第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成 划线无菌落可能的操作失误有___________________________ __________________________。 (4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离 心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是______________ _________________________________,该实验设计是否合理? 为什么?______________________。 [解析](1)微生物生长所需要的主要营养物质包括碳源、氮 源、水和无机盐。使用选择培养基是因为其允许特定的微生物 生长,同时又能抑制或阻止其他微生物的生长。(2)植物组织培 养常需要添加的植物激素有生长素和细胞分裂素。MS 培养基 的成分一般先分别配制成母液备用。(3)平板划线法接种时常通 用接种环划线。第二区域只有第一条线无菌落,而其他的划线 都有菌落,很可能是因为接种环在灼烧后未冷却,第一次划线 时将菌种烫死,而后接种环冷却,能正常划线,也可能是第一 次划线时划线未从第一区域末端开始
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