蛋白质的结构以及功能.ppt

（一）蛋白质一级结构与功能的关系 三、蛋白质结构与功能的关系 例如：镰刀形红细胞贫血 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · ·C(146) HbS β 肽链 HbA β 肽 链 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · ·C(146) 天然状态，有催化活性 尿素、 β-巯基乙醇 去除尿素、 β-巯基乙醇 非折叠状态，无活性 （二）蛋白质空间结构与功能的关系 例如：疯牛病中的蛋白质构象改变 疯牛病是由朊病毒蛋白(prion protein, PrP)引起的一组人和动物神经退行性病变。 正常的PrP富含α-螺旋，称为PrPc。 PrPc在某种未知蛋白质的作用下可转变成全为β-折叠的PrPsc，从而致病。 PrPc α-螺旋 PrPsc β-折叠 正常 疯牛病 ?蛋白质一级结构与功能的关系 一级结构决定蛋白质的空间结构； 一级结构决定蛋白质的生物学功能。 蛋白质空间结构与功能的关系 蛋白质构象是其生物学功能的基础， 构象改变功能改变。 第三节 蛋白质的理化性质 The Physical and Chemical Characters of Protein 一、蛋白质的两性解离与等电点 ?1. 蛋白质是两性电解质 蛋白质分子中可解离的基团 多肽两端游离的α-氨基和α-羧基 多肽侧链R上解离的基团 决定蛋白质解离成正负离子的因素 蛋白质所含酸性和碱性基团的数目 蛋白质所在溶液的pH值 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成 正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电 荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 2.蛋白质的等电点（pI） Pr NH 2 COO - Pr NH 3 + COOH Pr NH 3 + COO - OH - H + (pH＜pI) (pH＝pI) (pH＞pI) OH - H + 蛋白质的阳离子 蛋白质的兼性离子 蛋白质的阴离子 体内大多数蛋白质的等电点在pH5.0左右，因而在生理条件下以阴离子形式存在 。 电泳：带电粒子在电场中向相反电极移动的现象。　　 可用于分离蛋白质混合物。 蛋白质在带电场中泳动的速度和方向与其所带电荷的性质、数量及分子的大小、形状有关。带电荷多，分子小的泳动速度较快；反之则泳动较慢，从而达到分离蛋白质的目的。 3.电泳 常见垂直平板电泳示意图 A：染色后显示的蛋白质区带 B：光密度扫描定量分析 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白分为： 清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白。 二、蛋白质的胶体性质 蛋白质属于生物大分子之一，分子量可自1万至100万之巨，其分子的直径可达1～100nm，为胶粒范围之内。 * 蛋白质胶体稳定的因素 1.颗粒表面同种电荷 2.水化膜 + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 水化膜 + + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 不稳定的蛋白质颗粒 酸 碱 酸 碱 酸 碱 脱水作用 脱水作用 脱水作用 溶液中蛋白质的聚沉 蛋白质胶体性质的应用： 透析用于分离纯化蛋白质 超速离心用于蛋白质的分离纯化及分子量的测定。 三、蛋白质的变性、沉淀和凝固 * 蛋白质的变性(denaturation) 在某些物理或化学因素的作用下，蛋白质特定的空间构象被破坏，从而导致其理化性质改变和生物活性丧失，称为蛋白质的变性。 造成变性的因素 物理因素：高温、高压、紫外线、电离辐射、超声波等。 化学因素：强酸、强碱、有机溶剂、尿素、重金属盐等。 变性的本质 ——次级键断裂（有时也包括二硫键），空间结构破坏，但蛋白质的一级结构不改变。 变性蛋白质的特点： A.生物学活性丧失 B.溶解度降低，易于沉淀 C.粘度增加 D.结晶能力消失 E.易被蛋白酶水解 应用举例 临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。 此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。 若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性(renaturation) 。 牛核糖核酸酶的一级结构 二硫键 天然状态，有催化