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专题2课题1第3课时
专题2 微生物的培养与应用
课题1微生物的实验室培养(高二生物)
第3课时 纯化大肠杆菌(方法二)结果分析与评价
菌种的保藏
【学习目标】
1 学生预习教材P19内容,结合第2课时的学习,初步整理归纳出稀释涂布平板法的操作过程
2课堂上通过观看视频,教师提示,学生合作探究,学生能够准确理解并掌握
(1)“稀释涂布平板法”操作技术;
(2)“稀释涂布平板法”的操作注意事项以及原因
(3)菌种的保藏方法
3对本实验的结果进行科学的分析和评价
重点 稀释涂布平板法 实验结果的分析和评价
难点 稀释涂布平板法
【课前预习】
(二)稀释涂布平板法
阅读教材P19“稀释涂布平板法”的相关内容,整理归纳出稀释涂布平板法的操作过程
1稀释涂布平板法:将菌液先进行一系列的 ,然后将不同稀释度的菌液分别 到 培养基的表面,进行培养。如果稀释度足够高,则能在培养基表面形成 菌落。该方法分为两个环节:
和
2 系列稀释操作
认真阅读教材P19关于该操作的图,文字,解决下列问题:
(1)该操作过程中涉及到了哪些无菌操作的措施?
(2)如果原始菌液的细菌密度是108个/Ml,请计算:理论上6支试管中的细菌密度分别是多少?
3 涂布平板操作
(1)涂布平板操作过程中使用的接种工具是什么?
(2)该操作过程中涉及到了哪些无菌操作的措施?
【预习自测】
1以下操作用到接种环的是( )
A平板划线操作 B系列稀释操作 C涂布平板操作 D倒平板操作
2微生物的接种技术最常用的有( )
①平板划线法?②稀释涂布平板法?③斜面接种?④穿刺接种
A ①②③ B ①② C ②③④ D ①②③④
3稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( )
A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
4涂布平板操作需要用到( )
A接种环、滴管、酒精灯 B接种环、移液管、酒精灯
C涂布器、移液管、酒精灯 D涂布器、接种环、酒精灯
【课堂学习,合作探究】
(二)稀释涂布平板法
结合预习内容,观看视频,思考以下问题,整理好答案
1系列稀释操作
向试管中注入菌液时,为什么要用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次?
2涂布平板操作
准确理解教材中的2个注意事项
3两种纯化细菌的方法的比较
项目
优点
缺点
适用范围
平板划线法
可以观察 特征,对混合菌进行
计数
适用于 菌
稀释涂布平板法
可以计数,可以观察菌落特征
吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延
适用于 菌和
菌
(三)微生物的培养
接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱内培养,观察记录结果. 思考?为什么放置一个未接种的培养基于37℃恒温箱内培养
三 结果分析与评价
1 如何判断大肠杆菌的分离纯化成功了?
2未接种的培养基表面如果有菌落生长,说明了什么?
3如果接种后的培养基上有不同形态的菌落,请分析原因
4培养12h和24h后的菌落大小,菌落分布位置一样吗?分析原因?
四 菌种的保藏
完成教材P20“课题延伸”的学习,填写下表
保藏方法
保藏对象
培养基
保藏条件
缺点
临时保藏法
甘油管保藏法
【巩固练习】
1分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的叙述错误的是 ( )。
A均将大肠杆菌接种在固体培养基的表面
B获得的每个菌落均是由一个细菌繁殖而来的子细胞群
C都应在火焰附近进行操作,以防止杂菌污染
D稀释分散菌种的原理不同,均能达到分离纯化大肠杆菌的目的
2下表是从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答下面的问题。
试剂
用量
试剂
用量
牛肉膏/g
5
琼脂/g
20
蛋白胨/g
10
水/mL
1 000
NaCl/g
5
—
—
(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________________。培养基配制完成以后,一般还要调节pH并对培养基进行________处理。
(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是______________和______________。
(3)假设培养结束后,发现培养基上菌落连成一片,可能的
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