肿瘤靶向治疗的分子标靶应用进展.pptVIP

4. 显色原位杂交技术(CISH) 用碱性磷酸酶标记的探针，在甲醛固定、石蜡包埋组织切片上进行杂交，再用鼠抗地高辛抗体和辣根过氧化物酶抗鼠抗体进行免疫组合，DAB显色，普通光镜观察有无基因扩增的异常信号的技术。 缺乏内对照，无多种颜色信号，不能完全取代FISH。 HER2基因：CISH 无扩增：大于50%肿瘤细胞每个核内有1-5个信号点； 低拷贝扩增：大于50%的肿瘤细胞核内有6-10个信号点； 高拷贝扩增：大于50%的肿瘤细胞核内有多于10个信号点或者凝结成团块状、簇状信号颗粒。 （若杂交信号在5-6个，难以判断的，应经FISH重新检测） CISH检测无HER2基因扩增样本 A diploid-triploid HER2 copy number is usually clear CISH检测低扩增样本 CISH检测高拷贝扩增样本 Gene copy clusters: 100% evidence of gene amplification c-erbB2 IHC vs. FISH c-erbB2 score Gene amplification by FISH 0 4% 1 7% 2 10-35% 3 90% Concordance between FISH and IHC HER-2 status determination using the 30% criterion FI