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乐百氏（广东）饮用水有限公司
微生物大样检测作业指导书
总部文件
编写人：
陈爱矿
版本号：
01
文件编号：
HOD – 02
生效日期：
2006.2.1
Page PAGE 1 of NUMPAGES 3
修改内容
版本号
修改日期
主要修改内容
分发：
签名：
编写
审核
批准
姓名 :
陈爱矿
黄志敏
签署 :
日期 :
1． 目的：
对一定数量可能含菌但含菌数较少、检出率较低的透明状液体样品进行定性检测，以判断其是否带菌。
适用范围：
适用于HOD工厂的成品水、空桶和聪明盖中微生物状况的评估。本文件取代目前工厂现有关于大样检测的作业指导书。
3. 具体内容：
3.1培养基的制备：抗臭氧型细菌大样检测液体培养基、抗臭氧型真菌大样检测液体培养基（广东环凯），大样培养基必须制备为双倍料培养基（双倍料是除蒸馏水外，其余成分加倍）。按标签说明和使用要求，制备培养基，分装50mL于150或250mL的三角瓶中，。在121℃高压条件下灭菌15分钟，待用。
3.2 空桶大样检测操作：
3.2.1 桶的取样
3.2.1.1 在灌装间，取冲洗消毒后灌装前的桶，迅速用已消毒的聪明盖人工封盖后标明工位编号带回化验室待检。
3.2.1.2 取样要求，
a、取样前必须用75%酒精消毒手部，保证无菌操作。
b、封口所用盖须保证无菌。
3.2.2 桶的检测
3.2.2.1每个桶中加入150ml无菌水，手持空桶尽量平放，边旋转边摇动，使无菌水充分涤洗空桶内壁。整个涮洗过程大于20秒，使无菌水充分涤洗空桶内壁。
3.2.2.2 把空桶中水样，分别注入50ml已制备好的细菌和霉菌液体培养基中，摇匀待培养。
3.2.2.3 用50mL的无菌水代替样品作为空白对照样品
3.3盖的大样检测操作
3.3.1 盖的取样：将500ml取样瓶（非玻璃材质且带盖），瓶口用牛皮纸包扎，在121℃下蒸汽灭菌15分钟。在落盖槽出口，用无菌镊子取两个盖，置灭菌的取样瓶中，然后用盖封紧，带回化验无菌间检测。
3.3.2 盖的检测：在取样器中加入250ml无菌水，使聪明盖内外与无菌水充分接触，振荡均匀1分钟，制成样品。分别注入50ml上述样品置于已制备好的细菌和霉菌液体培养基中，摇匀待培养。
3.4成品水大样检测操作：
取50ml成品水于已制备好的细菌和霉菌液体培养基中，摇匀待培养。
3.5培养：
检测细菌，置于35~37℃下培养24小时后观察；检测霉菌，置28~32℃下培养48小时后观察。
检测细菌时，如与空白对照比较出现混浊，则表明样品中存在细菌，越混浊，表明细菌数量越多；检测霉菌时，如出现团状絮状物，则表明样品中存在霉菌，絮状物越多，表明霉菌数量越多。
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