酶四章酶催化作用.ppt

2. pH 的影响 在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常称此pH 为最适 pH。 3. 温度的影响 一方面是温度升高,酶促反应速度加快。 另一方面,温度升高,酶的高级结构将发生变化或变性，导致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个最适温度。 在最适温度条件下,反应速度最大。 研究酶抑制剂极其抑制作用的意义 ——在理论上，有助于阐明酶活性中心结构，催化机理，代谢途径以及代谢调节，有助于阐明药物和毒物作用机理； ——在实践上，可以为治疗人类和畜禽传染病而设计疗效更高的抗菌抗病毒药物；为消灭农作物病虫害而设计更有效的杀虫剂和杀菌剂；为解除毒物对人畜的中毒而设计快速有效解毒药物。 酶的抑制剂以及应用 4 抑制剂对酶活性的影响 使酶的活性降低或丧失的现象，称为酶的抑制作用。 能够引起酶的抑制作用的化合物则称为抑制剂。　 酶的抑制剂一般具备两个方面的特点： a.在化学结构上与被抑制的底物分子或底物的过渡状态相似。 b.能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物。 抑制程度的表示方式 ——抑制程度是指酶受到抑制后， 其活性降低的程度，是研究酶抑制作用的一个重要指 标，一般用反应速度的变化表示。以V0表示无抑制剂 时的反应速度，V1表示有抑制剂时的反应速度，酶的 抑制程度有以下表示方式： （1）相对活力分数 a = V1/ V0 （2）相对活力百分数 a% = V1/ V0 ×100(%) （3）抑制分数 i= 1- a = 1- V1/ V0 （4）抑制百分数 i% = (1-a) ×100(%) 通常抑制率就是指的抑制分数或抑制百分数。 抑制作用的分类 不可逆抑制作用（irreversible inhibition)： 不可逆抑制剂与酶分子的必需基团共价结合，引起酶活性丧失，用透析等物理方法不能去除。 可逆抑制作用（reversible inhibition)：可逆抑制剂与酶分子必需基团非共价结合，引起酶活性降低或丧失，但用透析等物理方法可以去除抑制剂而恢复活性。 ——按酶抑制剂与酶结合方式不同可分为同位抑制作用和别位抑制作用； ——按抑制剂与底物的关系，分为4种类型：竞争性抑制，反竞争性抑制，非竞争性抑制和混合型抑制。 竞争性抑制作用（competitive inhibition) 含义：抑制剂（I）和底物（S）竞争酶的底物结合部位，二者不能同时与酶结合；增加S可以降低I与酶的结合；在酶量不变的情况下，反应速度V取决于S和I的相对浓度。 动力学特征：Km 增大，Vm不变；表观米氏常数 K’m随[I]的增加而增大；抑制程度随[I]的增加而增大，随[S]的增加而减小，甚至消除。 机理：I与S在结构上类似，竞争酶活性中心底物结合部位。 应用：可以以此为依据合成许多药物，从而实现杀虫，杀菌，治疗传染病以及治疗肿瘤的目的。 竞争性可逆抑制图示 反竞争性抑制作用（unconmpetitive inhibition) 含义：I只能与ES结合形成ESI，I与酶的结合反而促进S与E的结合，但ESI不能释放产物；增加[S]不能消除或减轻抑制。 动力学特征：Km和Vm随[I]增加而减小；抑制程度随[S]和[S]增加而增大；增加[S]反而增加抑制程度。 举例：在双底物有序反应中，第二底物的竞争性抑制剂就是第一底物的反竞争性抑制剂。 非竞争性抑制作用（noncompetitive inhibition) 含义：I可以结合于E和ES上，S也可以结合于E和EI上，但形成的ESI没有催化活性。I并不改变E与S的亲和力，S也不改变E与I的亲和力。 动力学特征：Vm随[I]的增加而减小，但Km不变；抑制程度随[I]的增加而增大，与[S]无关；增加[S]不能消除非竞争性抑制。 机制：I不是结合于酶活性中心的底物结合部位上，而是结合于其它的必需基团上（如催化基团）。 举例：别嘌呤醇是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂，能抑制次黄嘌呤形成黄嘌呤及尿酸的过程；同时它也是黄嘌呤氧化酶的底物，形成氧嘌呤醇；氧嘌呤醇是黄嘌呤氧化酶的非竞争性抑制剂，可以降低尿酸的形成，可以治疗血液中尿酸过多引起的关节炎。 非竞争性可逆抑制图示 可逆抑制作用的动力学特征 1. 竞争性抑制 加入竞争性抑制剂后，Km 变大，酶促反应速度减小。 无抑制剂 竞争性抑制剂 1/Vmax 加入非竞争性抑制剂后，Km 虽然不变，但由于Vmax减小，所以酶促反应速度也下降了。 2.非竞争性抑制 无抑制剂 非竞争性抑制剂 -1/km 混合型抑制作用（mixed type inhibition) E ES