医药通心络逆转动脉粥样硬化兔内皮功能损害研究.pptVIP

通心络逆转动脉粥样硬化兔 内皮功能损害的研究 复旦大学附属中山医院 上海市心血管病研究所 葛均波，周京敏 教授 为何研究内皮功能？ 内皮功能异常的临床意义 ? 是动脉粥样硬化的始动环节 ? 是临床动脉粥样硬化疾病的标志 – Endothelial dysfunction shows a strong association with coronary artery disease and can be a useful noninvasive tool for the evaluation of coronary artery disease. Indian Heart J. 2003 Jan-Feb;55(1):44-8. ? 内皮功能是临床动脉粥样硬化疾病预后 的独立预测因素 – Independent predictors of coronary events by noninvasive FMD J Am Coll Cardiol. 2003 Sep 17;42(6):1037-43. – Independent predictor of cerebrovascular events in thosse without CHD. Circulation. 2003 Jun 10;107(22):2805-9. 内皮功能异常的临床意义 内皮功能改善的临床意义 ? Preserved endothelial function attenuates the risk of future events associated with a high plaque burden. – J Am Coll Cardiol. 2003 Sep 17;42(6):1037-43. ? 对已形成动脉粥样硬化的血管，通心络是否具 有改善内皮功能的作用？ 材料与方法 ? 新西兰大白兔 ? 正常饮食组： 6 只 ? 高脂饮食组： 30 只， 8 周后（成动脉粥样硬化模型） 随机分为： – 继续高脂饮食组： 10 只 – 高脂饮食＋通心络干预组（ 1000mg/kg/d ）： 10 只 – 高脂饮食＋氟伐他汀干预组 (10mg/kg/d) ： 10 只 ? 血清总胆固醇浓度测定： 1 ， 8 ， 12 周 ? 血管内皮功能的检测 ? NOS 、 GSH-PX 、 MDA 的检测 ? 氧化 LDL 受体（ LOX – 1 ）表达的检测 检测指标 血管内皮功能的检测 1. 气体栓塞法处死动物 2. 取胸主动脉作离体主动脉环（ 4 ～ 5mm ） 3. 用不锈钢钩固定于含克氏液的浴槽，通过张力换能器连接 二道生理记录仪 4. 静息张力为 3g ，平 衡 120min 后，用苯肾上腺素 ( 10 - 7 mol/L) 预收缩血管环 5. 观察 Ach( 10 -9 ～ 10 -5 mol/L) 引起的血管内皮依赖的舒张反应 6. 再以苯肾上腺素 ( 10 - 7 mol/L) 收缩血管环 7. 观察对硝普钠 (10 -8 ～ 10 -6 mol/L) 的舒张反应 血管 MDA ， GSH － PX ， NOS 的检测 ? 主动脉丙二醛（ MDA ）含量：应用硫代巴比妥酸比色法 ? 主动脉谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH － PX ）活力：二硫代 二硝基苯甲酸比色法 ? 主动脉总 NOS 活性：应用催化 L-Arg 法 LOX – 1 受体表达的检测 ? LOX-1mRNA 的表达： RT － PCR 方法 ? LOX-1 蛋白表达： Western Blotting 方法 结 果 实验第 1, 8, 12 周血脂总胆固醇水平的变化 血清总胆固醇（ mg/dl ） 1 周 8 周 12 周 正常对照组 ( ｎ =6) 46.3 ± 14.3 49.7 ± 14.6 47.5 ± 7.3 高脂饮食组 ( ｎ =10) 49.7 ± 7.9 840.8 ± 52.8** 810.8 ± 32.3** 来适可干预组（ n=10) 43.6 ± 6.0 873.0 ± 77.5** 110.1 ± 87.5 ## 通心络干预组 ( ｎ =10) 50.1 ± 10.2 804.6 ± 83.5** 739.1 ± 83.5 注：与正常对照组比较： **P0.01 ；与高脂饮食组比较： ## P0.01 内皮依赖性血管舒张反应 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 9 8 7 6 5 血 管 的 舒 张 度 通心络干预组 高脂饮食组 正常饮食组 来适可干预组 Ach浓度(mol/L)的负对数值(-lg[Ach]) ** 注：通心络干预组与高脂饮食组比较： ##P0.01; 氟伐他汀组与高脂饮食组比较： *