微生物检验实验室枸橼酸杆菌属标准操作规程.doc

微生物检验实验室枸橼酸杆菌属标准操作规程 1. 概述 枸橼酸杆菌属包括弗劳地枸橼杆菌、异型枸橼酸杆菌、无丙二酸枸橼酸杆菌、魏氏枸橼酸杆菌、塞氏枸橼酸杆菌等11个种。临床上以弗劳地枸橼酸杆菌最为常见。 2. 标本类型 痰液、脑脊液、穿刺液、脓液、血液等标本。 3. 鉴定 形态与染色：革兰阴性杆菌，有周鞭毛，能运动，无芽胞，无荚膜。 3.2 培养特性 在血琼脂平板上形成直径2～4mm、灰白色、湿润、隆起、边缘整齐的不溶血菌落；在麦康凯琼脂平板上形成中等大小、红色、混浊的菌落；在中国蓝琼脂平板上形成中等大小、蓝色菌落。异型枸橼酸杆菌在麦康凯琼脂平板上形成较大、黄色的菌落。 3.3 生化反应 氧化酶试验阴性；发酵葡萄糖和甘露醇，不发酵阿拉伯糖，甲基红、动力、ONPG和硝酸盐还原试验阳性，赖氨酶脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、V-P试验均为阴性，大多数菌株产H2S. 3.4 鉴别要点： 3.4.1 本菌特征 在麦康凯琼脂平板上多数呈粉红色菌落，赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶试验阴性，大多数菌株产H2S。 3.4.2 枸橼酸杆菌属各种之间的鉴别：见表5-44。 表5-44 枸橼酸杆菌属各种之间的生物学特性（阳性％） 菌名 吲哚 H2S 尿素酶 鸟氨 酸 KCN 丙二酸盐 蔗糖 卫矛醇 阿东醇 棉子糖 蜜二糖 弗劳地枸橼酸杆菌 33 78 44 0 89 11 89 11 0 44 100 异型枸橼酸杆菌 99 0 75 99 0 95 40 40 99 0 0 无丙二酸枸橼酸杆菌 100 5 85 95 99 1 9 1 0 5 0 法氏枸橼酸杆菌 100 0 59 100 93 0 100 2 0 100 100 杨氏枸橼酸杆菌 15 65 80 5 95 5 20 85 0 10 10 布氏枸橼酸杆菌 33 60 47 93 100 0 7 33 0 7 80 魏氏枸橼酸杆菌 0 100 100 0 100 100 0 0 0 0 0 塞氏枸橼酸杆菌 83 0 100 100 0 100 0 100 0 0 100 C.rodentium 0 0 100 100 0 100 0 0 0 0 0 DNA基因种10 0 67 0 0 100 100 33 0 0 0 67 DNA基因种11 100 67 67 0 100 0 33 100 0 33 33 3.5 操作步骤 3.5.1 氧化酶试验 参见 氧化酶试验标准操作规程 。 3.5.2 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行细菌鉴定。 4. 药敏 参见 药物敏感性试验标准操作规程 及CLSI M100-S20最新版本文件。 5. 质量控制 参见 质量管理程序 。 6. 检验结果解释与分析 本菌易产生诱导酶，临床上使用三代头孢菌素治疗的过程易产生耐药性，通常在治疗3-4日左右即转化为耐药菌株，因此应定期复查菌株的敏感性。 7. 临床意义 弗劳地枸橼酸杆菌是人和动物肠道的正常菌群，也是条件致病菌，能引起腹泻和肠道外感染如脑膜炎、败血症等疾病。 8. 鉴定流程 尿、痰、血液等麦康凯琼脂平板呈粉红色菌落 尿、痰、血液等 麦康凯琼脂平板呈粉红色菌落 仪器或手工鉴定并做药敏试验 枸橼酸菌属 氧化酶- 参考文献 [1] 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2008 编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：